資料簡介
什么是實時熒光定量PCR?
實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技術,簡稱qPCR,是在PCR反應體系中加入熒光物質(zhì)(熒光染料或熒光標記的特異性探針),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
與普通PCR相比,實時熒光定量PCR技術是一次由定性技術向定量技術的飛躍。運用該項技術,可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、絕對定量和定性分析。
實驗流程:
在實時熒光定量PCR實驗中,可以分為樣本采集,RNA提取,RNA質(zhì)量鑒定,反轉(zhuǎn)錄及數(shù)據(jù)分析幾個步驟,在進行引物、模板的稀釋,試劑的配制和補足反應體系時都會用到水,水質(zhì)量的好壞直接影響最終數(shù)據(jù)分析的結(jié)果。
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