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Western blot作為一個經典的蛋白定量技術,被成為蛋白表達研究的金標準,已成為每個分子生物學實驗室所必須要做的一個實驗。但是Western blot 技術本身的發(fā)展卻非常緩慢,尤其在成像檢測技術方面已有20多年的時間沒有新的突破。
最早人們使用的成像方法是DAB顯色,因為該方法另靈敏度和定量范圍不夠,早已被淘汰。后來出現(xiàn)了化學發(fā)光方法,有兩種成像方式,暗房壓片和冷CCD成像,暗房壓片定量范圍太小,無法對很多樣品精確定量,因此也逐漸被人們所拋棄,現(xiàn)在主要使用的是冷CCD成像,冷CCD成像因為有鏡頭、樣品成像距離太長、芯片太小等缺點,導致成像靈敏度還不如暗房壓片,定量范圍也不能滿足科研越來越高的要求。也有人嘗試用熒光的方式來做western成像,但是由于Western膜本身的熒光背景干擾,導致熒光方法的靈敏度遠不如化學發(fā)光方法,因此也極少使用。
e-BLOT革命性的接觸化學發(fā)光成像技術,充分利用了化學發(fā)光法的高靈敏度,克服了冷CDD成像的諸多缺點,跨越數(shù)量級的提升成像靈敏度、定量范圍和效率,YLWestern成像進入一個全新的時代。
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