詳細(xì)介紹
通用原則:
1, 魯氏不動(dòng)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒先選擇好探針,然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針。
2, 擴(kuò)增子的長(zhǎng)度應(yīng)不超過400bp,理想的能在100-150bp內(nèi),擴(kuò)增片斷約短,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
3, 保持GC含量在20%和80%之間,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),從而會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,及在SG分析中非特異信號(hào)。
4, 為了保證效率和重復(fù)性,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,尤其是G(不能有4個(gè)連續(xù)的G)
5, 將引物和探針互相進(jìn)行配對(duì)檢測(cè),以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成。
b),探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
1,在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
2,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,如果是目測(cè)探針,則要仔細(xì)審查GC富含區(qū)。
3,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會(huì)有淬滅作用,即使被切割下來這種淬滅作用也還會(huì)存在
4,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會(huì)降低反應(yīng)效率,這時(shí)就應(yīng)選擇配對(duì)的另一條鏈作為探針。
6, 探針應(yīng)盡可能的短,不要超過30個(gè)bp。
7, 檢測(cè)探針的DNA折疊和二級(jí)結(jié)構(gòu)。
產(chǎn)品名稱 | 魯氏不動(dòng)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Acinetobacter lwoffi |
編號(hào) | BJP2023 |
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原理:
產(chǎn)品僅用于科研所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測(cè)方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
產(chǎn)品特點(diǎn):
全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反應(yīng)的過程中抑制非特異擴(kuò)增,從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性;
采用新型的熒光染料EvaGreen,與傳統(tǒng)熒光染料相比,對(duì)PCR反應(yīng)抑制更小,而且熒光信號(hào)更強(qiáng),檢測(cè)靈敏度更高;產(chǎn)品僅用于科研
含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過程中PCR產(chǎn)物的交叉污染;
TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物、探針、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分,并配備2×Buffer,可完成不同類型熒光探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng),方便用戶使用;
試劑盒的通用性強(qiáng),可適用于Roche的Light Cycler、ABI各型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀和。
服務(wù)流程:
1.客戶認(rèn)真寫好訂單,提供待檢基因相關(guān)信息;
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同,支付預(yù)付款(30-50%);
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物(或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成);
4.DNA/RNA的抽提、定量、RNA反轉(zhuǎn)錄;
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn),主要檢測(cè)引物的特異性和擴(kuò)增效率;
6.正式定量實(shí)驗(yàn):對(duì)所有樣品上機(jī)檢測(cè);
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析,形成報(bào)告。產(chǎn)品僅用于科研
以下是公司*產(chǎn)品:
酸性α-酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)Rat thrombin receptor,TR ELISA Kit
ATPase染色液(鈣鈷法)Rat anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit
葡萄糖-6-磷酸酶染色液(鉛法)Rat C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit
酰膽堿酯酶染色液(鉛銅硫膽堿法)rat follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
酰膽堿酯酶染色液(鉛銅硫膽堿法)Rat thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit
酰膽堿酯酶染色液(亞鐵氰化銅法)Rat plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit
酰膽堿酯酶染色液(亞鐵氰化銅法)Rat von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
琥珀酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)Rat coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA Kit
乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)Rat corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit
乳酸脫氫酶染色液(H型,四唑鹽法)rat adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit
人TRAIL R1三聚氰胺ELISA快速檢測(cè)試劑盒(檢乳制品/組織/飼料/蛋類/血清,靈敏度1ppb,一步法)
人血小板生成素(TPO)四環(huán)素類ELISA快速檢測(cè)試劑盒(檢雞肉/豬肉/蜂蜜,靈敏度0.05ppb,一步法)
人腫瘤壞死因子β (TNFβ)新ELISA快速檢測(cè)試劑盒(檢組織/乳制品,靈敏度0.5ppb,一步法)
人腫瘤壞死因子β (TNFβ)β-興檢測(cè)試劑盒(檢尿樣/組織/飼料,靈敏度0.2ppb,兩步法)
人腫瘤壞死因子α (TNFα)ELISA KIT 沙胺醇(Salbutamol)快速檢測(cè)試劑卡(尿樣/組織/飼料/豬血清,3-5ppb,消線法)
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsRⅡ) 喹醇代謝物(MQCA)ELISA檢測(cè)試劑盒(檢組織,靈敏度0.2ppb,一步法)
人腫瘤壞死因子可溶性受體I(TNFsRI) (CLEN)快速檢測(cè)卡(檢尿樣/組織/飼料/血清,檢測(cè)限1-3ppb,消線法)
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)克倫特羅-萊克多巴胺 兩聯(lián)快速檢測(cè)試劑卡(檢尿樣,檢測(cè)限3-5ppb,消線法)
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)萊克多巴胺(Rac)殘留快速檢測(cè)試劑卡(尿樣/組織/飼料/血清,檢測(cè)限3-5ppb,消線法)
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)克倫特羅-萊克多巴胺-沙胺醇 三合一快速檢測(cè)試劑卡(檢尿樣,檢測(cè)限3-5ppb,消線法)