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流式細(xì)胞儀結(jié)構(gòu)簡介
2020年05月28日 17:51:39 來源:化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量:4504

流式細(xì)胞儀(Flow cytometer )是對細(xì)胞進(jìn)行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來。

  【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)】流式細(xì)胞儀(Flow cytometer )是對細(xì)胞進(jìn)行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來。
 
  流式細(xì)胞儀主要由四部分組成:流動室和液流系統(tǒng)、激光源和光學(xué)系統(tǒng)、光電管和檢測系統(tǒng)、計算機(jī)和分析系統(tǒng)。
 
  流動室和液流系統(tǒng)
 
  流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學(xué)玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。設(shè)計和制作均很精細(xì),是液流系統(tǒng)的心臟。為了保證液流是穩(wěn)液,一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用,被檢測細(xì)胞被限制在液流的軸線上。
 
  激光源和光學(xué)系統(tǒng)
 
  經(jīng)特異熒光染色的細(xì)胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光;激光器又以氬離子激光器為普遍,也有配和氪離子激光器或染料激光器。在免疫分析中常要同時探測兩種以上的波長的熒光信號,就采用二向色性反射鏡,或二向色性分光器,來有效地將各種熒光分開。
 
  光電管和檢測系統(tǒng)
 
  經(jīng)熒光染色的細(xì)胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號而進(jìn)行測量的。光電倍增管(PMT)為常用。PMT的響應(yīng)時間短,僅為ns數(shù)量級;光譜響應(yīng)特性好,在200~900nm的光譜區(qū),光量子產(chǎn)額都比較高。從PMT輸出的電信號仍然較弱,需要經(jīng)過放大后才能輸入分析儀器。
 
  流式細(xì)胞計中一般備有兩類放大器。一類是輸出信號輻度與輸入信號成線性關(guān)系,稱為線性放大器。另一類是對數(shù)放大器,輸出信號和輸入信號之間成常用對數(shù)關(guān)系。
 
  計算機(jī)和分析系統(tǒng)
 
  經(jīng)放大后的電信號被送往計算機(jī)分析器。多道的道數(shù)是和電信號的脈沖高度相對應(yīng)的,也是和光信號的強(qiáng)弱相關(guān)的。多道分析器出來的信號再經(jīng)模-數(shù)轉(zhuǎn)換器輸往微機(jī)處理器編成數(shù)據(jù)文件,或存貯于計算機(jī)的硬盤和軟盤上,或存于儀器內(nèi)以備調(diào)用。計算機(jī)的存貯容量較大,可存貯同一細(xì)胞的6~8個參數(shù)。存貯于計算機(jī)內(nèi)的數(shù)據(jù)可以在實(shí)測后脫機(jī)重現(xiàn),進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析,后給出結(jié)果。
 
  除上述四個主要部分外,流式細(xì)胞儀還備有電源及壓縮氣體等附加裝置。
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