種內(nèi)有:鐵細(xì)菌/腐生菌/硫酸鹽還原菌/大腸菌群/石油烴降解菌/細(xì)菌測試瓶
鐵細(xì)菌/腐生菌/硫酸鹽還原菌/細(xì)菌測試瓶方法原理:
采用絕跡稀釋法,即用無菌注射器將待測定的水樣逐級注入到測試瓶中,進(jìn)行接種稀釋后,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng),依據(jù)測試瓶陽性反應(yīng)和稀釋的倍數(shù),計算出水樣中細(xì)菌量總數(shù)。
操作步驟:
① 將同一品種測試瓶排成一組,依次編上序號(按照估計的細(xì)菌量確定測試瓶個數(shù),建議參考數(shù)值為:X×100的細(xì)菌量用3個測試瓶、X×101的細(xì)菌量用4個測試瓶、X×102的細(xì)菌量用5個測試瓶、X×103的細(xì)菌量用6個測試瓶)。
做二個平行樣重復(fù)試驗時應(yīng)排為二組;做三個平行樣重復(fù)試驗時應(yīng)排為三組。
② 用無菌注射器取1ml代表性水樣(采樣方法依據(jù)GB/T12997-1991、GB/T12998-1991、GB/T14581-1993的規(guī)定進(jìn)行)注入1號瓶內(nèi)稀釋,充分振搖,待用(平行樣亦按此操作,下同); ③ 用另一支無菌注射器從1號瓶內(nèi)抽取1 ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入2號瓶內(nèi)稀釋,充分振搖,待用;
④ 再用一支無菌注射器從2號瓶中內(nèi)抽取1ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入3號瓶內(nèi)稀釋,充分振搖,待用;
⑤ 依次類推稀釋直到后一瓶為止,待用。
⑥ 將上述所有稀釋過的測試瓶放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),按表1進(jìn)行細(xì)菌生長的鑒別。
表1 細(xì) 菌 生 長 的 鑒 別 方 法
細(xì)菌瓶品種 | 規(guī)格型號 | 培養(yǎng)溫度 | 培養(yǎng) 時間 | 陽性反應(yīng)特征 | |
細(xì)菌總數(shù)測試瓶 | KBC—BT | 37±2℃ | 24±2h | 瓶中液體由紅變黃、或液體混濁、或液體表面出現(xiàn)菌膜、或液體底部出現(xiàn)沉淀。 | |
大腸菌群測試瓶 | 總大腸菌 | KBC—TCB | 37±2℃ |
24±2h |
瓶中液體由紫紅變黃 |
糞大腸菌 | KBC—TCB | 44±2℃ | |||
腐生菌測試瓶 | KBC—TGB | 現(xiàn)場采樣溫度±3℃ | 24±2h | 瓶中液體由紅變黃 | |
鐵細(xì)菌測試瓶 | KBC—FEB | 7d | 瓶中液體棕色褪去,生成棕色或黑色沉淀 | ||
硫酸鹽還原菌測試瓶 | KBC—SRB | 7d | 瓶中無色液體變黑或生成黑色沉淀 | ||
石油烴降解菌測試瓶 | KBC—HDB
| 29±2℃ | 5d | 瓶中液體由紫紅變黃 |
細(xì)菌量計量:
1.在一定溫度下培養(yǎng)一定時間后,按瓶號列出稀釋梯度,并依據(jù)細(xì)菌瓶陽性反應(yīng)的個數(shù),確定生長指標(biāo)和級數(shù)(參見附錄及示例).
2.根據(jù)生長指標(biāo)查表2或表3,確定細(xì)菌量基數(shù)并乘以級數(shù),即為細(xì)菌量總數(shù)。
細(xì)菌量總數(shù)=細(xì)菌量基數(shù)×級數(shù)
二組平行樣重復(fù)試驗查表2
三組平行樣重復(fù)試驗查表3
3、細(xì)菌量總數(shù)結(jié)果報告示例見表4
注意事項
1、測試瓶中若有白色沉淀為過量營養(yǎng)成份,屬正?,F(xiàn)象,不影響測試。
2、低溫條件(約4℃)下,測試瓶儲存有效期為一年。
3、測試瓶每一級稀釋時,一定要用力振搖1~2分鐘,以保證測試結(jié)果的準(zhǔn)確性。
鐵細(xì)菌/腐生菌/硫酸鹽還原菌/細(xì)菌測試瓶