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實(shí)驗(yàn)概念
免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，可以同時(shí)比較多個(gè)樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。Western Blot方法成熟，大多實(shí)驗(yàn)室均具備Western Blot的實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?，但要得到一份背景清晰、條帶明亮、真實(shí)客觀的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需要豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，我們技術(shù)人員在樣品處理、轉(zhuǎn)膜和抗體稀釋比例等操作上具有豐富的操作經(jīng)驗(yàn)，能夠在短時(shí)間內(nèi)為客戶優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，提供客觀真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)流程：
客戶提供樣本及靶蛋白抗體→蛋白樣本抽取及定量→上樣→電泳→轉(zhuǎn)膜→封閉→抗體孵育顯色→膠片灰度分析數(shù)據(jù)處理
注意事項(xiàng)：
1.組織樣本，離體后盡快凍存。
2.有條件的話，先將樣本在液氮中速凍，再轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中保存。
3.對(duì)于心肝脾腎等組織可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1mg裂解液。加入裂解液前，盡量將組織樣本剪成小塊。
4.少量指標(biāo)，組織需要提供的樣本量要求50mg或更多；細(xì)胞樣本需要提供六孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量或更多。
5. 客戶可提供目標(biāo)蛋白一抗（我司可代購(gòu)）
6. 我司可免費(fèi)提取蛋白、提供二抗、免費(fèi)內(nèi)參，如GAPDH，β-actin等
采購(gòu)中心