傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基是一種普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供無機(jī)鹽。賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基是賽爾瑞成在傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來,能夠較傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基大大提高菌體密度,提高目的蛋白表達(dá)量數(shù)倍。
使用賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌培養(yǎng)時,流程與傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基使用方法一致,與“賽多培®大腸桿菌高密度表達(dá)培養(yǎng)基”有所區(qū)別的是,賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基仍需添加IPTG進(jìn)行目標(biāo)蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)。
應(yīng)用案例
1. 大腸桿菌DH5α培養(yǎng)對比結(jié)果
以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基,37°C,180rpm培養(yǎng):
2. 大腸桿菌BL21(DE3)培養(yǎng)對比結(jié)果
以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達(dá)蛋白O)。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應(yīng)抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng):
3. 大腸桿菌BL21(DE3)/pET21a-O誘導(dǎo)表達(dá)培養(yǎng)對比結(jié)果
以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達(dá)蛋白O)。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應(yīng)抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng),至OD600=1時,加入IPTG(終濃度1mM)誘導(dǎo)表達(dá)外源蛋白,繼續(xù)37°C培養(yǎng):
結(jié)論:在本次培養(yǎng)基和誘導(dǎo)表達(dá)條件下,O蛋白在賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基中的表達(dá)總量明顯高于傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基。
產(chǎn)品目錄
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 目錄價格 | 價格 |
賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基 | PR0301 | 500 mL | 85 | 買二送一 |
PR0302 | 10 L | 640 | 買二送一 | |
PR0303 | 10×10 L | 2760 | 買二送一 |
注:買二送一截止到2024年8元31日