Western Blot檢測服務(wù)
擁有檢測儀器,可以提供高通量的抗體檢測服務(wù);
具有豐富的檢測經(jīng)驗, 每年進(jìn)行10,000次以上抗體的Western Blot檢測;
擁有龐大的產(chǎn)品庫支持: 有100種以上細(xì)胞和組織裂解液,1,500多種WB應(yīng)用的抗體,以及多種優(yōu)質(zhì)二抗供您選購。
WB檢測服務(wù)內(nèi)容
Western Blot檢測案例展示
Western Blot實驗儀器平臺
WB檢測服務(wù)流程
Western Blot檢測相關(guān)內(nèi)容
WB(Western Blot)是一種用于檢測特定蛋白質(zhì)在樣本中的表達(dá)水平的實驗技術(shù)。
蛋白質(zhì)樣品的準(zhǔn)備:包括細(xì)胞或組織的裂解、蛋白質(zhì)的提取和定量。
蛋白質(zhì)的電泳分離:通常使用SDS-PAGE來根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量進(jìn)行分離。
轉(zhuǎn)移:將分離的蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物上,如PVDF或硝酸纖維素膜。
膜的封閉:為了防止非特異性結(jié)合,需要使用封閉液(如脫脂奶粉或BSA溶液)封閉膜上未被蛋白占據(jù)的部分。
一抗的孵育:使用特異性的一抗與目標(biāo)蛋白結(jié)合。
洗滌:去除未特異性結(jié)合的一抗。
二抗的孵育:使用標(biāo)記有酶或熒光團(tuán)的二抗與一抗結(jié)合。
洗滌:再次洗滌以去除未特異性結(jié)合的二抗。
檢測:使用底物進(jìn)行顯色或熒光檢測,酶標(biāo)記的二抗常用底物如ECL(增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光)。
條帶的定量分析:通過成像系統(tǒng)捕獲信號,并使用軟件對條帶的光密度進(jìn)行定量分析。
內(nèi)參照的選擇:選擇一個在不同樣本中表達(dá)相對恒定的蛋白質(zhì)作為內(nèi)參照,用于數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化。
實驗設(shè)計:包括樣本的收集、處理和分析,以及對照組和實驗組的設(shè)置。
抗體的選擇:選擇高特異性和親和力的抗體對目標(biāo)蛋白進(jìn)行檢測至關(guān)重要。
膜的選擇:根據(jù)實驗需求選擇合適的轉(zhuǎn)移膜,不同的膜對蛋白質(zhì)的結(jié)合能力不同。
轉(zhuǎn)移效率的優(yōu)化:通過調(diào)整電壓、時間和其他條件來優(yōu)化蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移效率。
非特異性結(jié)合的控制:采取措施減少非特異性結(jié)合,如優(yōu)化封閉液的組成和孵育條件。
數(shù)據(jù)的重復(fù)性和可重復(fù)性:確保實驗結(jié)果的可靠性,進(jìn)行多次重復(fù)實驗。
詳細(xì)信息可查看義翹神州,或者可加微信“sinobio2023”進(jìn)行聯(lián)系。