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異硫氰酸胍原料硫氰酸胍簡(jiǎn)稱病毒保存液:
CAS:593-84-0
分子式:C2H4N4S
分子量:116.145
外觀:白色結(jié)晶性粉末
用途:用于變性裂解細(xì)胞。
用途:提取RNA和DNA。
用途:無(wú)RNA酶和DNA酶活性。
異硫氰酸 胍溶液是否需要現(xiàn)用現(xiàn)配?
提取試劑以異硫氰酸 胍的終濃度為4M為例:先以42mM檸檬酸鈉、0.83%N-lauryl sarcosine(十二烷基,N-甲基甘氨酸鈉)、0.2mM β-巰基乙醇制得CSB緩沖液;異硫氰酸 胍25g、CSB緩沖液33mL,混合直至*溶解,可加熱在65℃助溶,制得變性液,4℃保存?zhèn)溆谩?/span>
所以,異硫氰酸 胍溶液可以不必非要現(xiàn)用現(xiàn)配,而且目前市場(chǎng)上也有不同濃度的溶液銷售,但放置時(shí)間不易過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)有沉淀析出,在使用前需要仔細(xì)檢查;另外,如果一次性配制過(guò)多,建議進(jìn)行分裝。
異硫氰酸胍硫氰酸胍(5mol/L)規(guī)格的配制步驟:
a. 取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
b. 用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
c. 用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
d.01mol·L-1 EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:
稱取計(jì)算量的EDTA二鈉鹽在燒杯中,加入適量水,攪拌溶解,轉(zhuǎn)移到試劑瓶中稀釋至800 mL。
e.標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液:
移取25.00mL Zn2+標(biāo)準(zhǔn)溶液,邊攪邊滴加 1:1 氨水至開(kāi)始析出Zn(OH)2 白色沉淀,加5mL NH3·H2O-NH4Cl緩沖溶液、50 mL 水,2~3滴鉻黑T,用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。溶液由酒紅色變?yōu)榧兯{(lán)色即為終點(diǎn)。
溶液配制好之后是否需要滅菌?
異硫氰酸胍溶液并沒(méi)有必要滅菌,該溶液并不是非常穩(wěn)定,而且配裂解液一般要用0.1%的DEPC水,水已經(jīng)進(jìn)行過(guò)滅菌。另外提取RNA的所有試劑在配制時(shí)都需要用DEPC水配制,而且試劑為新開(kāi)啟并作為RNA。
異硫氰酸胍硫氰酸胍用途:
硫氰酸胍緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。硫氰酸胍被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)。硫氰酸胍緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲(chóng)(C. elegans)核纖層蛋白(lamin)的中間纖維的形成。硫氰酸胍也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外,硫氰酸胍還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。硫氰酸胍也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。
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