兔子堿性成纖維細胞生長因子試劑盒

兔子堿性成纖維細胞生長因子試劑盒

兔子堿性成纖維細胞生長因子試劑盒——依托復(fù)旦大學(xué)，集研發(fā)、銷售、實驗室技術(shù)服務(wù)的產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、細菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。

類別簡介:"專業(yè)經(jīng)營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高， 代做ELISA實驗等。"

供應(yīng)商 :拜力生物

貨期 :7-10天

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。

5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。

7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

◇      液體類標本:標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。

◇      血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

◇      血漿：應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

◇      尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

◇      細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

完整的ELISA試劑盒包含以下各組分： (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)； (2)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物)； (3)酶的底物； (4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中)； (5)結(jié)合物及標本的稀釋液； (6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水； (7)酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。

實驗技術(shù)服務(wù)：熒光定量pcr服務(wù)、hplc(高效液相色譜法檢測)服務(wù)、emsa(凝膠遷移或電泳遷移率實驗)、酶聯(lián)免疫(elisa)實驗技術(shù)服務(wù)、免疫組化(ihc)技術(shù)服務(wù)、rna干擾(sirna,miran)、雙向電泳、免疫共沉淀、科研整體實驗外包服務(wù)、流式細胞檢測服務(wù)、細胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、四甲基偶氮唑鹽比色法(mtt方法、sci生物醫(yī)學(xué)論文服務(wù)、熒光原位雜交fish服務(wù)、載體構(gòu)建實驗技術(shù)服務(wù)、抑制性消減雜交(ssh)技術(shù)服務(wù)、單核苷酸多態(tài)性分析(snp)檢測服務(wù)、real-timepcr實驗技術(shù)服務(wù)。