聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒

本頁(yè)描述的產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不用于臨床，非醫(yī)療器械，不做其他用途。

聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

保存：室溫(15 ℃-25℃)  干燥保存，復(fù)檢期12 個(gè)月，2 ℃-8 ℃保存時(shí)間更長(zhǎng)。

本試劑盒采用可以高效、專(zhuān)一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和*的緩沖液系統(tǒng)，從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA片段，同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒回收的DNA可適用于后續(xù)各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR 、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。

操作步驟： 
*次使用前請(qǐng)先在15ml漂洗液中加入60ml無(wú)水乙醇，所有離心步驟均可使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。 
1 ．將單一的目的 DNA條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下（盡量切除多余部分），放入 1.5ml 離心管中，稱(chēng)取重量，用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入 2 倍體積的溶液A 吹打混勻（每 100mg 膠加入200ul 溶液A），75℃水浴30分鐘。 
2 ．用1ml 的去尖吸頭吸取混合物至過(guò)濾柱中（將膠一起吸入，溶液過(guò)多時(shí)可分次加入）。13,000rpm 離心1分鐘。將收集管中的濾出液轉(zhuǎn)入新離心管中。 
3. 取六倍體積溶液 B 加入原離心管中（每 100mg 膠加入600ul），清洗管壁后加入過(guò)濾柱中(溶液過(guò)多時(shí)可分次加入)，顛倒過(guò)濾柱或輕輕吹打幾次混勻，13,000rpm 離心1 分鐘。將所有收集的濾出液混合。 
4 ．將總濾出液混勻后加入吸附柱中（溶液過(guò)多時(shí)可分次加入），13,000rpm 離心30-60 秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。 
5 ．向吸附柱中加入 600μl 漂洗液（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），13,000rpm 離心30-60 秒，倒掉廢液，將吸附柱重新放入收集管中。
6 ．向吸附柱中加入 600μl 漂洗液，13,000rpm 離心30-60 秒，倒掉廢液。 
7 ．將離心吸附柱放回收集管中，13,000rpm 離心2 分鐘，盡量除去漂洗液。將吸附柱開(kāi)蓋置于室溫 1-2 分鐘，*晾干，以防止殘留的漂洗液影響下一步的實(shí)驗(yàn)。 
8 ．將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量 65–70℃預(yù)熱的洗脫緩沖液 20-30μ l ，室溫放置2 分鐘。13,000rpm 離心2 分鐘收集DNA溶液。注意：①為了增加回收效率，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，13,000rpm 再次離心1 分鐘。②洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于 20 μ l ，體積過(guò)小影響回收效率。③洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5 之間。
9 ．DNA回收產(chǎn)物直接后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者-20 ℃保存。
注意事項(xiàng)：  
1 ．電泳時(shí)使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。
2 ．切膠時(shí)，紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短，以免對(duì) DNA造成損傷。 
3 ． 本試劑盒對(duì)<50bp DNA 片段回收效率偏低（30% 左右），如要回收，應(yīng)加大結(jié)合液的體積，延長(zhǎng)吸附和洗脫的時(shí)間。 
4 ．回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。

聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒產(chǎn)品訂購(gòu)說(shuō)明：
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。

2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。 

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