Ni-NTA-瓊脂糖 KIRGEN
- 公司名稱 上海科進(jìn)醫(yī)療器材有限公司
- 品牌 KIRGEN/科進(jìn)
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2018/5/17 9:17:06
- 訪問(wèn)次數(shù) 530
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
產(chǎn)品名稱: Ni-NTA-瓊脂糖 KIRGEN
KG8222 Ni-NTA-瓊脂糖 25ml
KG8223 Ni-NTA-瓊脂糖 50ml
Ni-NTA蛋白提純?cè)恚篘I-NTA主要用于帶His標(biāo)簽蛋白的親和層析.
① Ni-NTA:瓊脂糖或者其他基質(zhì)共價(jià)連接NTA基團(tuán),NTA基團(tuán)與Ni形成四價(jià)螯合物,并留下Ni兩價(jià)用于與其他基團(tuán)結(jié)合.同樣作用的還有IDA基團(tuán),但NTA相對(duì)比較耐還原劑,因此使用較多.
② 組氨酸(His)的R基上帶有1個(gè)咪唑基團(tuán),咪唑基團(tuán)pKa值在6左右,在pH>7的條件下,咪唑基團(tuán)帶負(fù)電,容易與Ni離子結(jié)合.
③ 因此通過(guò)Ni-NTA吸附住的蛋白可以使用咪唑、組氨酸、或者其他含N化合物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)洗脫,也可以通過(guò)降低pH值使咪唑基團(tuán)帶正電從而洗脫蛋白.
④ NI-NTA上的Ni可以通過(guò)EDTA進(jìn)行螯合競(jìng)爭(zhēng)洗脫下來(lái).
⑤ 同樣的道理,其他過(guò)渡金屬離子如Cu2+、Co2+等也能起到和Ni一樣的作用,但是相比來(lái)說(shuō),Ni不容易引起蛋白變性.所以Ni柱較為常用.
⑥ 除了組氨酸外,還有一些氨基酸殘基如半胱氨酸等也能與金屬結(jié)合,但結(jié)合力比起組氨酸來(lái)說(shuō)較弱.可以通過(guò)加入NaCl等消除這種吸附.
Ni-NTA-瓊脂糖 KIRGEN產(chǎn)品說(shuō)明:鎳NTA親和層析介質(zhì),是由螯合劑(NTA)共價(jià)偶聯(lián)到Sepharose瓊脂糖介質(zhì)(6%交聯(lián)度)上,再螯合Ni2+而成。該介質(zhì)對(duì)6×His-tag蛋白具有顯著特異吸附能力,采用Sepharose瓊脂糖介質(zhì)比Agarose瓊脂糖介質(zhì)效果更好,顆粒粒度均勻,粒徑小,并且螯合鎳更穩(wěn)定,能耐受更高的還原劑,物理和化學(xué)穩(wěn)定性好,批次重復(fù)性好。已經(jīng)螯合好鎳離子,可直接用于6×His-tag融合蛋白的純化。