多克隆抗體,癌胚抗原相關細胞粘附分子8抗體
- 公司名稱 上海勁馬實驗設備有限公司
- 品牌 Abcam
- 型號
- 產地 美國
- 廠商性質 代理商
- 更新時間 2016/10/31 16:50:24
- 訪問次數 274
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產品名稱:癌胚抗原相關細胞粘附分子8抗體
濃 度: 1mg/1ml貯 存: 貯存于-20℃.
亞 型: IgG
性 狀: Lyophilized or Liquid
規(guī) 格: 0.1ml/0.2ml
儲 存: -20℃環(huán)境下存放. 封閉保存,否則會降低產品含量.
克 隆 性: 是
適應物種: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Sheep,
克隆類型:多克隆,單克隆
應用領域:本產品僅供科研使用,不做其他用途
抗體:是高等動物在抗原物質的刺激下由漿細胞產生的一類能與相應抗原發(fā)生特異性結合的免疫球蛋白。抗體通常存在于血清。
單克隆抗體及多克隆抗體:由單一克隆的細胞(通常是單一克隆的雜交瘤細胞)所產生的識別某一抗原表位的單一抗體;多克隆抗體是由多種細胞分別接觸相應抗原而產生的多種抗體的總和,多克隆抗體抗原識別抗原的多個表位。
抗體結構:抗體是由四條肽鏈構成的“Y”形對稱的分子,包括兩條重鏈和兩條輕鏈。在“Y”的*部位的氨基酸順序在不同的抗體分子中差別很大,是負責與抗原進行特異性結合的區(qū)域,稱為可變區(qū),余下的區(qū)域則稱為恒定區(qū)。
抗體作用原理:
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗體具體保存方法
大部分抗體收到后4℃短暫保存1-2周對抗體活性是沒有影響的。
如果抗體很快(1-2周)會使用,*在4℃保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。如果要*保存則是在-20℃ or -80℃。zui關鍵的一點是要根據說明書*的方式來正確的保存抗體!但是,腹水形式的產品請在收到后立即凍起來!因為該類產品含有大量的蛋白酶,*在4℃保存會導致抗體的降解!
大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要3-4周的時間,所以是在4℃的條件下來完成的。4℃運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸!
如何正確選擇“癌胚抗原相關細胞粘附分子8抗體”?
抗體的種類繁多,各種來源和標記令人眼花繚亂,供應商也參差不齊。如何選擇合適的抗體確實是個令人頭痛的問題,不妨從下面幾個方面著手選擇:
1 特異性:抗體能否特異性地結合特定的抗原,自然是選擇正確抗體的關鍵。同時還需要關注抗體特異識別抗原的部位,交叉反應性和抗原抗體結合的親和力。特異性與抗體制備時使用的抗原和抗體純化工藝密切相關。
2 來源和標記:通常單克隆抗體來源于小鼠,多克隆抗體來源于兔和山羊;以生物素,各種酶和熒光素標記,可根據實驗需要來選擇。
3 應用:不同的抗體能應用于不同的實驗,如ELISA,IHC,FC,WB和體內功能性實驗等等,往往需要通過相應的實驗來驗證,實驗時根據樣本和目的不同來選擇。
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抗體質量問題出現的原因及解決對策
絕大多數的抗體供應商都致力于提供高質量的抗體,然而,由于研究用抗體生產和銷售相關的公司數量龐大,難免有缺乏職業(yè)道德的供應商存在。不同供應商/分銷商常常采用不同的質量控制標準,有的很嚴格,有的根本不存在。使用這些抗體的科研人員一定要與特定的抗體供應商直接來發(fā)現或討論他們的質量控制過程。更麻煩的是有的抗體供應商/分銷商更改抗體的產品目錄號或批號, 或單抗的克隆名。改變抗體編號,再加上有些抗體本身質量不高,造成了現在抗體市場混亂中一個zui嚴重的問題。也就是說,如果一個抗體不合格,抗體使用者傾向于從其他供應商那里購買第二個抗體,卻并不知道第二個抗體是不合格的*個抗體改了目錄號或者批號又重新銷售的。一些不合格的抗體甚至能在短期內給抗體供應商/分銷商提供豐厚的收益。因此,對于每一個抗體使用者來說,確保購買的第二個抗體不是改版的*個抗體是極其必要的。
除了個別不法分子的存在以外,導致大量不合格的研究性抗體有多重的原因:
1)難以獲得對特定抗原特異性的抗體,
2)缺乏理想的抗體純化方案,
3)污染和儲存問題,
4)其他問題。
注意事項
1)對熒光標記的抗體的稀釋,要保證抗體的蛋白有一定的濃度,一般稀釋度不應超過1:20,抗體濃度過低,會導致產生的熒光過弱,影響結果的觀察。
2)染色的溫度和時間需要根據各種不同的標本及抗原而變化,染色時間可以從10 min到數小時,一般30 min已足夠。染色溫度多采用室溫(25℃左右),高于37℃可加強染色效果,但對不耐熱的抗原(如流行性乙型腦炎病毒)可采用0-2℃的低溫,延長染色時間。低溫染色較37℃30 min效果好的多。
3)為了保證熒光染色的正確性,*試驗時需設置下述對照,以排除某些非特異性熒光染色的干擾。
① 標本自發(fā)熒光對照:標本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特異性對照(抑制試驗):標本加未標記的特異性抗體,再加熒光標記的特異性抗體。
③ 陽性對照:已知的陽性標本加熒光標記的特異性抗體。
如果標本自發(fā)熒光對照和特異性對照呈無熒光或弱熒光,陽性對照和待檢標本呈強熒光,則為特異性陽性染色。
4)一般標本在高壓 燈下照射超過3min,就有熒光減弱現象,經熒光染色的標本在當天觀察,隨著時間的延長,熒光強度會逐漸下降。