3xFLAG peptide

南京信帆生物對(duì)質(zhì)量的控制涵蓋生物試劑、放行、市場(chǎng)質(zhì)量反饋的全過程，包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立、取樣、檢驗(yàn)和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場(chǎng)不良反饋樣品的復(fù)核等工作，確保產(chǎn)品品質(zhì)。信帆生物致力于追求企業(yè)的發(fā)展，以創(chuàng)新為根本，不斷優(yōu)化運(yùn)作，為每一位科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和更熱情的服務(wù)。

10MG/只 [￥920.00]

3xFLAG peptide

簡介：3X FLAG Peptide是一個(gè)合成的含有三個(gè)重復(fù)DYKXXD氨基酸序列的多肽。

氨基酸序列：MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK(簡稱)

N-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-C(全稱)

分子式：C120H169N31O49S 分子量：2861.87

技術(shù)指標(biāo)

外觀：凍干粉

純度：>95% by LC-MS

溶解性：water 2mg/ML; TBS (5mg/ml);

儲(chǔ)存條件：-20℃

運(yùn)輸條件：常溫運(yùn)輸

用途：蛋白洗脫；科研試劑。

使用方法推薦（來自公開文獻(xiàn)僅供參考）

一：常見儲(chǔ)存液或者工作液配置方法

儲(chǔ)存液配置：3xFLAG peptide溶于1X的TBS(pH7.4),濃度為5mg/ml; 分裝儲(chǔ)存于-20℃，避免反復(fù)凍融。

工作液配置：3xFLAG -peptide常用工作液濃度為100ug/ml，可用于從Anti-FLAG M2親和凝膠上洗脫3xFLAG融合蛋白。5倍柱體積的工作溶液即可充分洗脫大部分3xFLAG融合蛋白

二：F

哺乳動(dòng)物細(xì)胞FLAG標(biāo)簽蛋白純化方案

一般注釋以下方案基于并優(yōu)化了哺乳動(dòng)物細(xì)胞（U2OS）中FLAG標(biāo)記蛋白的過表達(dá)，該細(xì)胞生長在一個(gè)10平方厘米的平板上，以90%的融合率轉(zhuǎn)染，并在48小時(shí)后收獲。該方案適用于相互作用蛋白的共純化（基于FLAG-Ring1B/Bmi1）。

1重新懸浮和Sonicate細(xì)胞將冷凍的哺乳動(dòng)物細(xì)胞沉淀重新懸浮在2 mL FLAG純化懸浮緩沖液（1XPBS、1mM DTT、1X蛋白酶抑制劑）中。為了保持酶活性，這種再懸浮緩沖液不含任何裂解劑。除了超聲波處理（1%Triton X或其他）外，非用于活性采集的純化物還可以使用實(shí)際的裂解緩沖液。該方案僅使用超聲波處理。

將混合物轉(zhuǎn)移到干凈的2 mL微管中，用Misonix XL-2000聲波儀上的“振幅設(shè)置1[共20個(gè)]”超聲處理2次，每次持續(xù)10秒，中間暫停1分鐘。

2制備細(xì)胞裂解物并用磁珠孵育。在4℃下以12000 g離心細(xì)胞裂解物20分鐘，使裂解物碎片沉淀。

使用2mL“微量”純化柱，用2mL FLAG純化懸浮緩沖液沖洗柱。

將100µL M2 FLAG親和珠轉(zhuǎn)移到柱中，用2 mL FLAG純化懸浮緩沖液洗掉凝膠。

干燥柱鼻（底部），并用蓋子緊緊蓋上，然后轉(zhuǎn)移離心機(jī)中的上清液