白蛋白微量法測試盒

商品介紹：
白蛋白由肝實質(zhì)細胞合成，在血漿蛋白中含量最多，具有重要的生理功能，包括維持膠體滲透壓，并可與長鏈脂肪酸、膽汁酸、膽紅素、血紅素、鈣和鎂離子等物質(zhì)結(jié)合。它擁有抗氧化性和抗凝血性，能充當營養(yǎng)物質(zhì)和藥物的運輸載體，同時也是血漿PH值的緩沖劑。血清白蛋白含量直接關(guān)系到肝臟疾病、腎臟疾病、營養(yǎng)不良或蛋白流失性腸道病癥的發(fā)生發(fā)展，是臨床檢測的一個重要指標。

測定原理

白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷，可與帶負電荷的染料溴甲酚綠結(jié)合形成藍綠色復(fù)合物，在波長630nm處有吸收峰，在一定范圍內(nèi)其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

產(chǎn)品名稱：白蛋白微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號：GOY-01S6963
分類：蛋白含量測定系列

試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！
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