RBC-1601/RBC-1602 RBC裂解液

RBC裂解液，RBC-1601/RBC-1602 , 適用于裂解紅細胞，而不損傷其它有核細胞【產(chǎn)品簡介】：

ZDGSY生產(chǎn)的紅細胞裂解液(RBC Lysis Buffer)，是一種用于從人或動物的血液或組織樣品中裂解或去除紅細胞的溶液。本裂解液經(jīng)過優(yōu)化調(diào)整，只裂解紅細胞而幾乎不損傷其它有核細胞。 本產(chǎn)品包裝前已經(jīng)過無菌處理，如紅細胞裂解液處理后的樣品要做細胞培養(yǎng)或細胞融合，請在超凈工作臺內(nèi)進行整個裂解操作過程。

【保存條件】： 4°C保存，一年有效。室溫保存， 3個月有效。

【組織細胞樣品操作】：

1. 新鮮組織經(jīng)過膠原酶或胰酶等消化處理后，通過適當方法分散成細胞懸液，離心棄上清。
2. 加入3-5倍細胞體積的紅細胞裂解液，混勻，裂解1-2分鐘（本步驟可在室溫或4°C度操作）。
3. 10000rpm離心5分鐘，棄紅色上清。（4°C離心效果更佳）。
4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟2-3一次，通常微量紅細胞不會影響后續(xù)檢測。
5. 加入適量PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞（400-500g離心2-3分鐘，棄上清）。
6. 可重復(fù)第5步1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細胞沉淀體積的5倍，4°C離心效果更佳。
7. 根據(jù)實驗需求，用適量溶液重懸細胞后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。如組織細胞不需要培養(yǎng)等實驗，則洗滌步驟（4-6）可省去。

【血液樣品】：

1. 取新鮮抗凝血，加入3-5倍血液體積的紅細胞裂解液，混勻，裂解1-2分鐘（本步驟可在室溫或4度操作，對于鼠的血液，裂解1-2分鐘已經(jīng)足夠，對于人或牛大型動物的外周血，裂解時間需延長至6-10分鐘，并且裂解過程中要偶爾搖動試管以促進紅細胞裂解（裂解通常不超過15分鐘）。
2. 10000rpm離心5分鐘，棄上清(如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟1-3次。如所得BBC是用于核酸提取，則不需重復(fù)裂解過程，少量RBC的存在，并不影響下游實驗，且下列步驟可省去，棄上清后直接加入白血病裂解液即可按照核酸提取步驟操作)。
3. 加入5倍細胞體積的PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸有核細胞，10000rpm離心2-3分鐘，棄上清。
4. 根據(jù)實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。
5. 如所得白血病只是為提取DNA，則可在室溫下操作；若白血病為提取RNA，在4°C操作效果更佳。