hiPSC人誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞

hiPSC人誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞來源于ATCC，是將健康男性新生兒包皮細(xì)胞誘導(dǎo)成hiPSC，貼壁生長，呈克隆狀，可在hESC/iPSC完Q培養(yǎng)基中快速增殖，而邊緣分化的細(xì)胞則在該培養(yǎng)基中生長較慢，從而選擇性擴增并獲得高純度人多能干細(xì)胞。

細(xì)胞培養(yǎng)信息：

細(xì)胞名稱：hiPSC人誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞

細(xì)胞別稱：hiPSC；人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞；人多能干細(xì)胞

細(xì)胞來源：肝癌

生長特性:  貼壁生長

培養(yǎng)條件:  mTeSR™1

細(xì)胞含量：1×10?

細(xì)胞規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細(xì)胞用途：僅供科研使用。

hiPSC細(xì)胞培養(yǎng)注意事項：

1、不同品牌胰酉每消化時間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時間

2、消化傳代細(xì)胞時吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)

3、凍存液現(xiàn)用先配

運輸和保存：

1、1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

2、T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞到貨須知

1. 請客戶收到本公司原代細(xì)胞產(chǎn)品后，立即對物品包裝、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等拍照，如有疑問或問題，須在24小時內(nèi)通知本公司，提供照片和書面說明?？蛻羰盏椒莾龃嬖?xì)胞后，用75%酒精擦拭瓶身，再將原裝的原代細(xì)胞瓶放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，1-4小時后再使用，吸取瓶中培養(yǎng)液，換6ml完Q培養(yǎng)液。注意觀察細(xì)胞情況，待貼壁率達(dá)到90%以上再按傳代說明操作。請客戶使用T25細(xì)胞瓶傳代，一瓶傳二瓶。

2. 謹(jǐn)記：培養(yǎng)原代細(xì)胞前三天，需對原代細(xì)胞生長狀態(tài)進(jìn)行拍照并注明和標(biāo)記時間。若原代細(xì)胞培養(yǎng)生長存在質(zhì)量問題，需向本公司提供原代細(xì)胞培養(yǎng)生長的照片和書面說明。請客戶使用原代細(xì)胞第3代以內(nèi)。原代細(xì)胞培養(yǎng)傳代過多，可能造成原代細(xì)胞的質(zhì)量問題。

細(xì)胞培養(yǎng)

1.顧客收到T25瓶裝的細(xì)胞如果沒長滿，建議先放培養(yǎng)箱2-4小時

2.吸去培養(yǎng)液，取部分放入50ml離心管，放置于培養(yǎng)箱（放2-3天，觀察是否有污染）

3.加PBS清洗1-2遍，去PBS。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。1-2天換一次液（如果培養(yǎng)液變黃，必須盡快換液）

細(xì)胞傳代

1.細(xì)胞密度到達(dá)90%，可以進(jìn)行傳代。

2.吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍，去PBS。加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒，

3.加12ml完 Q培養(yǎng)基，吹打均勻，即可分到2個T25培養(yǎng)瓶里。（原代細(xì)胞1傳2，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板，建議先包被）

細(xì)胞凍存

1.選擇指數(shù)生長期的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍。去PBS，加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒，去胰酉每。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱，靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細(xì)胞直至細(xì)胞變圓，拍打瓶側(cè)使細(xì)胞脫落。

2.加1-1.5ml成品凍存液（本公司有賣的，無血清低DMSO，無需程序凍存），分裝至2ml凍存管里，放-80度冰箱過夜。第二天再轉(zhuǎn)至液氮

細(xì)胞復(fù)蘇

1.從液氮罐取凍存管，凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解。

2.在超凈臺將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶，再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基

3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可