間充質(zhì)干細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞

　　購(gòu)買國(guó)外細(xì)胞株需要考慮的因素有如下幾點(diǎn)：1、細(xì)胞株的生物等級(jí)，由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品，所以從國(guó)外購(gòu)貨比較麻煩。2、在購(gòu)買國(guó)外細(xì)胞株時(shí)，需交待國(guó)外加比較多的干冰（一般在13公斤以上，采用比較密封的泡沫盒加套紙箱）。 293F細(xì)胞，上海乾思生物公司細(xì)胞近3000種，來(lái)源于美國(guó)ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)量控制，在中國(guó)大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國(guó)內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁。293F細(xì)胞外，還有更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品，標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)?！?/p>

293F細(xì)胞* 細(xì)胞凍存 *
　　目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由冰晶形成的細(xì)胞損傷。
1、10%的DMSO+90%胎牛血清。甘油一般用于菌種保存很少用于細(xì)胞凍存。
2、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，用胰蛋白酶把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)，懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞則直接將細(xì)胞移至15ml離心管中。
3、離心1000 rpm,5 min。
4、去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的zui終密度為5x10^6/ml~1x10^7/ml。
5、 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者。
6、凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)到-25℃以下時(shí)，可增至-5℃~-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

購(gòu)買上海乾思物細(xì)胞注意事項(xiàng)（乾思生物）發(fā)布
　　一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；
　　收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
　　二、如為貼壁細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度：
　　1.  未超過(guò)80%匯合度時(shí)，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過(guò)火（嚴(yán)禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況調(diào)整）之后，傳代或者凍存。
　　2. 超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
　　1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；
　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM  EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)；
　　3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶。
　　三、如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
　　注意：換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。
　　四、細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
　　（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
　?。?）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
　?。?）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
　?。?）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
　　（5）視具體情況而定。
　　五、細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
　?。?）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
　　（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
　?。?）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
　?。?）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
　?。?）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
　?。?）視具體情況而定。
　　六、售后服務(wù)政策
　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan   NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex    Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價(jià)，另常備  Trizol  DMSO  lipo2000     lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現(xiàn)貨 ；貨期短，價(jià)格優(yōu)，售后齊全。
　　細(xì)胞污染問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；細(xì)胞活性問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們調(diào)查核實(shí)后予免費(fèi)調(diào)換，不收取任何費(fèi)用。
　　需要客戶關(guān)于293F細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明、細(xì)胞操作處理方法、細(xì)胞質(zhì)量問(wèn)題反饋表。
　　如用戶收到細(xì)胞8-30天之內(nèi)，因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染，我公司將優(yōu)惠價(jià)重新提供一株原細(xì)胞
　293F細(xì)胞質(zhì)量可靠，售后有保障
★我?guī)旒?xì)胞近3000種，來(lái)源于美國(guó)ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)量控制。
凍存細(xì)胞時(shí)間為5-7個(gè)工作日，活細(xì)胞為7-15個(gè)工作日。
★由于細(xì)胞庫(kù)現(xiàn)有細(xì)胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤，需要了解293F細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞價(jià)格及詳細(xì)資料請(qǐng)老師，對(duì)您造成的不便還請(qǐng)見諒！
（編輯：tanxi）