角膜上皮細胞 角膜上皮細胞

　　購買國外細胞株需要考慮的因素有如下幾點：1、細胞株的生物等級，由于有些細胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。2、在購買國外細胞株時，需交待國外加比較多的干冰（一般在13公斤以上，采用比較密封的泡沫盒加套紙箱）。 293F細胞，上海乾思生物公司細胞近3000種，來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制，在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁。293F細胞外，還有更多相關實驗產(chǎn)品，標準品，細胞株和實驗技術服務等等前期后續(xù)服務。　

293F細胞* 細胞凍存 *
　　目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由冰晶形成的細胞損傷。
1、10%的DMSO+90%胎牛血清。甘油一般用于菌種保存很少用于細胞凍存。
2、取對數(shù)生長期的細胞，用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來，懸浮生長的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中。
3、離心1000 rpm,5 min。
4、去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的zui終密度為5x10^6/ml~1x10^7/ml。
5、 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者。
6、凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min；當溫度達到-25℃以下時，可增至-5℃~-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

購買上海乾思物細胞注意事項（乾思生物）發(fā)布
　　一、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；
　　收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
　　二、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：
　　1.  未超過80%匯合度時，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調(diào)整）之后，傳代或者凍存。
　　2. 超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
　　1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；
　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM  EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來；
　　3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶。
　　三、如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
　　注意：換液時一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。
　　四、細胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么？
　　（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
　　（2）凍存的細胞復蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
　?。?）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
　?。?）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
　?。?）視具體情況而定。
　　五、細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
　?。?）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
　?。?）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
　?。?）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
　?。?）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
　?。?）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
　　（6）視具體情況而定。
　　六、售后服務政策
　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan   NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex    Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，另常備  Trizol  DMSO  lipo2000     lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現(xiàn)貨 ；貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。
　　細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結果；細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果，我們調(diào)查核實后予免費調(diào)換，不收取任何費用。
　　需要客戶關于293F細胞細胞培養(yǎng)說明、細胞操作處理方法、細胞質(zhì)量問題反饋表。
　　如用戶收到細胞8-30天之內(nèi)，因處理不當造成細胞死亡或污染，我公司將優(yōu)惠價重新提供一株原細胞
　293F細胞質(zhì)量可靠，售后有保障
★我?guī)旒毎?000種，來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制。
凍存細胞時間為5-7個工作日，活細胞為7-15個工作日。
★由于細胞庫現(xiàn)有細胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯誤，需要了解293F細胞相關細胞價格及詳細資料請老師，對您造成的不便還請見諒！
（編輯：tanxi）