PPSQ-31A/33A系列全自動(dòng)蛋白/多肽序列儀

PPSQ-31A/33A系列全自動(dòng)蛋白/多肽序列儀

日本銷售業(yè)績(jī)300臺(tái)（PPSQ-31A/33A系列全自動(dòng)蛋白/多肽序列儀）的可靠技術(shù)，且具備更易使用的新軟件。在傳統(tǒng)PPSQ系列功能的基礎(chǔ)上，通過新開發(fā)的序列軟件，將原有的PPSQ系統(tǒng)與HPLC系統(tǒng)的雙系統(tǒng)軟件整合為可編程邏輯控制器，使分析條件的選擇/錄入，反應(yīng)步驟及分析結(jié)果等可簡(jiǎn)單地在一畫面運(yùn)行。另外，運(yùn)行氨基酸測(cè)序時(shí)，通過新開發(fā)的可編程邏輯控制器進(jìn)行重要的色譜再加工，可按照樣品單位分別處理多個(gè)色譜，大幅度提高數(shù)據(jù)的分析能力。而且，如果采用新的HPLC分析系統(tǒng)，可降低噪音水平，進(jìn)行PTH-氨基酸的高靈敏度檢測(cè)。

蛋白質(zhì)N端的意義

幾乎所有的蛋白質(zhì)合成都起始于N-端，蛋白質(zhì)N-端的序列組成對(duì)于蛋白質(zhì)整體的生物學(xué)功能有著巨大的影響力。例如N-端序列影響蛋白質(zhì)的半衰期，同時(shí)關(guān)聯(lián)著蛋白亞細(xì)胞器定位等，這些與蛋白的功能和穩(wěn)定息息相關(guān)，對(duì)蛋白進(jìn)行N-端測(cè)序分析，有利于幫助分析蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)，揭示蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能。

測(cè)定蛋白質(zhì)N端序列的方法

目前對(duì)蛋白N端測(cè)序主要分類兩大類，其一為非質(zhì)譜技術(shù)，例如經(jīng)典的Edman降解法、利用反轉(zhuǎn)錄RT-PCR得到對(duì)應(yīng)蛋白的cDNA，再來反推得到蛋白序列；其二為質(zhì)譜技術(shù)。各自都有其使用的長(zhǎng)處和制約之處，目前，市面上采用的，依然是基于經(jīng)典的Edman降解法原理，利用Shimadzu公司PPSQ-31A蛋白序列測(cè)序系統(tǒng)進(jìn)行蛋白N-端測(cè)序。

N端測(cè)序的原理

蛋白質(zhì)和多肽N-端測(cè)序技術(shù)是以Edman化學(xué)降解法為基礎(chǔ)的，Edman化學(xué)降解，其基本原理是包括通過異硫氰酸苯脂與蛋白質(zhì)和多肽的N-端殘基的偶聯(lián)，苯氨基硫甲酰酞（PTC-肽）環(huán)化裂解，和噻唑呤酮苯氨（ATZ）轉(zhuǎn)化為苯異硫尿氨基酸（PTH-氨基酸）三個(gè)主要的化學(xué)步驟，每個(gè)循環(huán)從蛋白質(zhì)與多肽裂解一個(gè)氨基酸殘基，同時(shí)暴露出新的游離的氨基酸進(jìn)行下一個(gè)Edman降解，最后通過轉(zhuǎn)移的PTH-氨基酸鑒定實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)序列的測(cè)定。