ABI Prism 7900HT / FAST型熒光定量PCR儀

ABI Prism 7900HT / FAST型熒光定量PCR儀是繼7700、5700型熒光定量PCR儀之后，ABI公司新推出的高通量實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)。它是兼容96孔板和384孔板的熒光定量PCR儀，也是可選手工進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣的熒光定量PCR儀。7900HT型熒光定量PCR儀可滿足從中通量到高通量實(shí)驗(yàn)的需求。

ABI Prism 7900HT / FAST型熒光定量PCR儀的主要特點(diǎn):
●高效平臺(tái)-7900HT系統(tǒng)是為支持高通量而構(gòu)建的， 光學(xué)系統(tǒng)經(jīng)優(yōu)化以適用于384孔板熒光信號(hào)的激活和實(shí)時(shí)檢測(cè)。
●結(jié)果可靠-7900HT系統(tǒng)采用了與7700、5700相同的定量原理，利用Ct值（Ct定義為在基線上方產(chǎn)生可檢測(cè)到的統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的熒光發(fā)射的這一PCR循環(huán)）和起始拷貝數(shù)的對(duì)應(yīng)關(guān)系，通過(guò)外標(biāo)準(zhǔn)曲線精確計(jì)算未知樣品的起始拷貝數(shù)。
●高度重現(xiàn)性-7900HT系統(tǒng)的熒光檢測(cè)發(fā)生在PCR對(duì)數(shù)期的起始，因此反應(yīng)管中各組分沒(méi)有任何限制反應(yīng)因素，從而確保檢測(cè)結(jié)果都是精確并能重復(fù)的。
●*的熒光檢測(cè)技術(shù)-RISM® 7900HT熒光定量PCR系統(tǒng)在不降低速度、分辨率的情況下有效提高了產(chǎn)率，這是基于*的熒光檢測(cè)技術(shù)：一束激光掃描并激活384個(gè)孔的每一個(gè)孔里的熒光染料，熒光信號(hào)通過(guò)光柵分光，經(jīng)過(guò)分離的多色熒光同時(shí)到達(dá)CCD攝像機(jī)，實(shí)現(xiàn)多色熒光同時(shí)檢測(cè)。
●自動(dòng)進(jìn)樣裝置-7900HT系統(tǒng)配備有自動(dòng)化配件可取得高效率。自動(dòng)化裝置可容納84塊384孔板，機(jī)械手臂可按一定順序?qū)⒋郎y(cè)樣品板運(yùn)送至主機(jī)內(nèi)，配備的條形碼閱讀器（Bar code reader）可自動(dòng)識(shí)別進(jìn)入主機(jī)的樣品板編號(hào)，使你在任何時(shí)間可以在樣品行列中插入或替代樣品板。
●多樣的化學(xué)試劑-7900HT型熒光定量PCR儀上可使用的化學(xué)試劑包括TaqMan熒光探針?lè)ê蚐YBR Green熒光染料法。TaqMan探針?lè)ň哂懈叨鹊撵`敏度和特異性，適用于實(shí)時(shí)定量的多重反應(yīng)或單核苷酸多態(tài)性分析（SNP）。SYBRGreen染料應(yīng)用于目標(biāo)鑒定（篩選測(cè)定）或者在只需用少數(shù)幾個(gè)反應(yīng)的測(cè)定中為理想。
●有效防污染-7900HT系統(tǒng)在PCR全過(guò)程中使用專門(mén)設(shè)計(jì)的和始終密閉的樣品管。在加入樣品和試劑后這些管子便立即封閉并在擴(kuò)增和檢測(cè)過(guò)程中保持這種狀態(tài)，這樣就可以大大地減少污染的機(jī)會(huì)；此外，7900HT系統(tǒng)不存在PCR后處理，有效防止擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境的污染而造成的假陽(yáng)性。
●多種定量方法-ABIPRISM® 7900HT序列檢測(cè)系統(tǒng)軟件為基因表達(dá)提供一種定量化方法。定量是從一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接測(cè)定目標(biāo)（基因）的量。相對(duì)定量方法是通過(guò)與標(biāo)定樣品相比較而計(jì)算未知樣品的量，不需要標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.定量
為了測(cè)定未知樣品中的目標(biāo)（基因）的數(shù)量，7900HT系統(tǒng)可用來(lái)測(cè)定樣品的CT，然后用一條標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)測(cè)定起始的拷貝數(shù)。在標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制中，7900HT系統(tǒng)軟件首先用已知的起始拷貝數(shù)的幾種稀釋度計(jì)算它們的CT值。接著，軟件使用測(cè)得的CT值對(duì)應(yīng)于起始拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)值作圖。至少在五個(gè)數(shù)量級(jí)范圍中兩者呈線性關(guān)系。
2.相對(duì)定量
對(duì)于基因表達(dá)研究來(lái)說(shuō)，相對(duì)定量是理想的方法。這里不是應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線而是相對(duì)于標(biāo)定樣品計(jì)算表達(dá)水平。用一個(gè)內(nèi)源對(duì)照來(lái)標(biāo)定樣品的量。這一方法與7900HT系統(tǒng)在一個(gè)多重反應(yīng)中能同時(shí)對(duì)目標(biāo)和內(nèi)源對(duì)照進(jìn)行定量測(cè)定的能力相結(jié)合，可實(shí)現(xiàn)高效、高通量的基因表達(dá)研究。
有效的SNP檢測(cè)手段
除實(shí)時(shí)定量測(cè)定以外，7900HT系統(tǒng)包括對(duì)于已知的單一核苷酸多態(tài)性（SNPS）作大規(guī)模篩選的軟件。在一對(duì)等位基因系統(tǒng)中，用對(duì)應(yīng)于兩個(gè)等位基因的兩個(gè)TaqMan探針在同一個(gè)試管中做多重PCR反應(yīng)。反應(yīng)終止時(shí)所產(chǎn)生的熒光用7900HT系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)分析軟件迅速取得。

儀器規(guī)格和技術(shù)指標(biāo):
· 系統(tǒng)組成
7900HT熒光定量PCR儀－384孔或96孔可更換式半導(dǎo)體控溫PCR儀
488nm 長(zhǎng)壽氬離子激光器
X,Y 雙軸同步熒光掃描頭
光柵和CCD檢測(cè)裝置
自動(dòng)進(jìn)樣裝置
DELL GX 270電腦
Windows 2000 操作系統(tǒng)
儀器控制， 數(shù)據(jù)采集及結(jié)果分析軟件
Primer Express引物探針設(shè)計(jì)軟件
大產(chǎn)率
實(shí)時(shí)定量檢測(cè)－5000樣品/天（標(biāo)準(zhǔn)模式），96樣品/35分鐘（快速模式）
終點(diǎn)SNP分析－30000樣品/2.5小時(shí)