產(chǎn)品介紹

在Mg²⁺存在的條件下，DNA酶對(duì)DNA的每條鏈都起作用，DNA酶的作用位點(diǎn)具有隨機(jī)性。在Mn²⁺存在的條件下，DNase I在DNA的兩條鏈上的*位置切割，從而產(chǎn)生1-2個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的平末端或突出末端。

該產(chǎn)品不包含RNA酶抑制劑，在使用時(shí)，需注意RNA酶的污染。

在不同的緩沖體系下，降解一定質(zhì)量的DNA所需的酶量可能有所不同，例如，在鹽濃度大于100 mM時(shí)會(huì)抑制DNA酶的活性。

10×反應(yīng)緩沖液是由400mM Tris-HCl (pH 8.0)，100mM MgSO₄以及10mM CaCl₂組成。

酶儲(chǔ)存緩沖液: DNase 的儲(chǔ)存緩沖液為 10mM HEPES (pH 7.5)，50% glycerol (v/v)， 10mM CaCl2和 10mM MgCl2。

熱失活: 在含有終止緩沖液的條件下 65 ℃反 應(yīng) 10 min。

抑制劑: EGTA； EDTA； 鹽濃度>100mM 將 會(huì)抑制 DNA 酶的活性。

分子量: 31,000 kDa

必要條件: Ca 2? 及 Mg 2? 或 Mn 2? 。

來(lái)源: 牛胰腺

終止緩沖液: 20mM EGTA (pH 8.0)。

酶活性單位的定義: DNA 酶的單位活性是在 50 uL 40mM Tris-HCl (pH 7.9)，10mM NaCl， 6mM MgCl2 和 10mM CaCl2組成的緩 沖液中 37 ℃，10 min 降解 1ug lambda DNA 所需的酶量。在這些條件下，1 個(gè)單位的 DNA 酶活性和 1 個(gè) Kunitz 單位近似相同。

使用建議

該產(chǎn)品不包含 RNA 酶抑制劑，在使用 時(shí)，需注意 RNA 酶的污染。 在不同的緩沖體系下，降解一定質(zhì)量的 DNA 所需的酶量可能有所不同，例如，在鹽 濃度大于 100 mM 時(shí)會(huì)抑制 DNA 酶的活性。

質(zhì)量控制

RNA 酶測(cè)定: 為了檢測(cè) RNA 酶的活性，將 50ng [ 3 H]RNA 與 5 個(gè)單位的不含 RNA 酶的 DNA 酶在 37℃，轉(zhuǎn)錄緩沖液中孵育 1 個(gè)小 時(shí)，通過(guò)閃爍計(jì)數(shù)檢測(cè)產(chǎn)生的放射性標(biāo)記的 核苷酸。