CellCelector 高通量雜交瘤篩選系統(tǒng)

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CellCelector高通量雜交瘤篩選系統(tǒng)?

在克隆篩選中為了下游處理的順利，選擇高產(chǎn)雜交瘤細(xì)胞克隆用以更多的生產(chǎn)出抗體是非常重要的----所以又稱為“高產(chǎn)者克隆篩查”。在培養(yǎng)基中隱藏的抗體可以通過熒光標(biāo)記二抗結(jié)合方法變?yōu)榭梢?，形成分布在?xì)胞克隆中的熒光暈狀物質(zhì)。在雜交瘤細(xì)胞克隆群中生產(chǎn)出的抗體能夠非常明顯的被分辨出來（見下圖） 。通過比較克隆細(xì)胞（在亮視野可視）與克隆細(xì)胞周圍暈的尺寸大?。ㄔ跓晒庖曇跋拢？梢杂?jì)算出抗體產(chǎn)量的比例，就是我們常說的質(zhì)量系數(shù)。在細(xì)胞培養(yǎng)板中具有高質(zhì)量系數(shù)的細(xì)胞克隆是高的抗體生產(chǎn)者。通過這種方法掃描樣本，甚至可以從一批培養(yǎng)板中找到數(shù)量不多的高產(chǎn)者。

CellCelector高通量雜交瘤篩選系統(tǒng)
圖為觀察高產(chǎn)雜交瘤細(xì)胞克?。菏疽鈭D為通過熒光標(biāo)記二抗（綠黃色）來觀察雜交瘤細(xì)胞克隆（淺藍(lán)色）和抗體（深藍(lán)色）（A-C）；顯微鏡觀察（亮視野熒光信號的疊加圖片）在熒光標(biāo)記二抗孵化后雜交瘤細(xì)胞克?。―-F）；從圖中可以對比看出抗體產(chǎn)量的強(qiáng)度與克隆周圍熒光暈面積內(nèi)徑大小的相關(guān)性：（A和D）是克隆沒有產(chǎn)出抗體，（B和E）克隆生產(chǎn)出中等數(shù)量的抗體，（C和F）為高產(chǎn)抗體克隆=“高產(chǎn)者”。但克隆的大小都是相似的（見D-F中右下角放大亮視野圖片）