Hieff® Multiplex pcr Kit
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 翌圣生物
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/7 13:46:37
- 訪問次數(shù) 498
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100 T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 13279ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
Hieff® Multiplex PCR Kit
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Hieff® Multiplex PCR Kit | 13279ES60 | 100 T | 875.00 |
Hieff® Multiplex PCR Kit | 13279ES76 | 500 T | 3165.00 |
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品適用于多重PCR實(shí)驗(yàn)。Hieff® Multiplex PCR Kit以多重PCR酶制劑與2×擴(kuò)增緩沖液為組分的試劑盒,可快速便捷地用于PCR反應(yīng),具備高均一性、高特異性和高靈敏度的特點(diǎn),可以對(duì)20對(duì)及以上的引物特異、均一地進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
13279ES60 (100 T) | 13279ES76 (500 T) | ||
13279-A | Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 100 μL | 500 μL |
13279-B | 2×Hieff® Multiplex PCR Buffer | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
【注】:13279-A組分避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸與保存
冰袋運(yùn)輸。-20℃儲(chǔ)存,有效期1年。
反應(yīng)體系
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer | 25 | 1× |
Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 1 | - |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA總量:1 ng-200 ng | - |
無菌超純水 | up to 50 | - |
【注】 1)上表中DNA量和引物濃度均為推薦濃度,可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)整適濃度。
2)每條引物的濃度可在0.1 μM-0.5 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。
3)2×Hieff® Multiplex PCR Buffer中已經(jīng)包含擴(kuò)增所需要的Mg2+、dNTP、鹽離子等,無需額外添加。
擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度(℃) | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 |
| 15-45 |
退火 | 50-60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】 1)在PCR儀上設(shè)置上表中的反應(yīng)程序進(jìn)行多重PCR反應(yīng)(設(shè)置熱蓋溫度至105℃左右)
2)使用本產(chǎn)品獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物無需添加上樣緩沖液,可直接上樣用于電泳檢測(cè)。
3)延伸時(shí)間以長擴(kuò)增片段為準(zhǔn),可適當(dāng)延長延伸時(shí)間,但要避免過長時(shí)間帶來的非特異性擴(kuò)增。
實(shí)驗(yàn)案例分享
以人基因組DNA為模板,使用10對(duì)引物進(jìn)行多重PCR反應(yīng),分別擴(kuò)增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反應(yīng)體系配制
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer | 25 | 1× |
Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 1 | - |
Primer mix | 10 | 0.1 μM |
模板DNA | 1 | 2 ng/μL |
無菌超純水 | up to 50 | - |
擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度(℃) | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 |
| 35 |
退火 | 60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
電泳檢測(cè)
2%瓊脂糖凝膠;電壓130 V;電泳時(shí)間30 min。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
M:100 bp DNA ladder
Lane1-2:10重PCR產(chǎn)物
HB200511