G-422 G422 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞/鏡像綺點（iCell）

G422 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞/鏡像綺點（iCell）介紹
1964年建株；甲基膽蒽植入Km小鼠腦內(nèi)誘發(fā)星形細胞瘤，傳至第120代后轉(zhuǎn)為膠質(zhì)細胞瘤；瘤細胞懸液同系小鼠皮下、肌肉、腦內(nèi)移植，成功率皆100%。肌肉及腦內(nèi)移植可形成較規(guī)律的移植性瘤株，存活時間腦內(nèi)型15.9±4.8天；肌肉型20.3±6.6天。

細胞特性
1）來源：星形細胞瘤
2）形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長
3）含量：>1x10⁶ 個/mL
4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細胞接受后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

細胞用途：僅供科研使用。
                     
G422 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞/鏡像綺點（iCell）培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號11995-065)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X10⁶個細胞凍存。

鏡像綺點（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹：

       一、原代細胞服務(wù)：
              各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
              多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
              原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
              原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實驗外包服務(wù)

       二、細胞系服務(wù)：
              細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書
              細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)
              細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等

       三、iPS細胞服務(wù)：
              iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
              iPS細胞增殖及冷凍保存
              iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí)
              新藥及實驗儀器上市前評估

       四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶定制服務(wù)等

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