細(xì)胞力學(xué)細(xì)胞體積測(cè)定系統(tǒng)

細(xì)胞力學(xué)細(xì)胞體積測(cè)定系統(tǒng)，實(shí)時(shí)跟蹤貼壁細(xì)胞的細(xì)胞體積，

細(xì)胞體積是細(xì)胞力學(xué)的一個(gè)關(guān)鍵參數(shù)，對(duì)理解細(xì)胞粘附相關(guān)過(guò)程和改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法具有重要意義

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Cell volume, ion pumps

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有幾種生理和病理學(xué)過(guò)程，其中細(xì)胞經(jīng)歷體積變化。 但是，沒(méi)有可靠的方法可用于實(shí)時(shí)準(zhǔn)確地測(cè)量貼壁細(xì)胞的體積。

細(xì)胞體積評(píng)估的好處

將細(xì)胞培養(yǎng)在光學(xué)透明的腔室中，該腔室可以準(zhǔn)確地確定其隨時(shí)間的體積，并可以并行跟蹤負(fù)責(zé)體積變化的生化過(guò)程，例如激活離子泵。

例子

從相間期到Raji細(xì)胞有絲分裂的體積追蹤[2]。

（A）將細(xì)胞放置在由FITC-Dextran補(bǔ)充的培養(yǎng)基中，其高度由立柱設(shè)定，其高度已校準(zhǔn)到聚二甲基硅氧烷中。 底部圖片：細(xì)胞在熒光圖像上不顯示熒光（比例尺為20 mm）。

（B）對(duì)應(yīng)于（A）中虛線的熒光輪廓：熒光強(qiáng)度的大值和小值分別對(duì)應(yīng)于腔室的大高度（背景）和零高度（支柱）。 右：這些值用于校準(zhǔn)信號(hào)并計(jì)算細(xì)胞的光學(xué)厚度。

（C）后，通過(guò)積分整個(gè)細(xì)胞區(qū)域的總熒光強(qiáng)度獲得細(xì)胞體積。

（A）HeLa細(xì)胞的體積軌跡。 在開始和結(jié)束時(shí)兩個(gè)體積超調(diào)對(duì)應(yīng)于有絲分裂的瞬時(shí)體積增加，di一個(gè)對(duì)應(yīng)于母細(xì)胞，第二個(gè)對(duì)應(yīng)于子細(xì)胞。

（B）（A）中具有FXm的細(xì)胞的原始熒光圖像。 比例尺50毫米

REFERENCES

[1] Zlotek-Zlotkiewicz, E. et al. (2015). Journal of Cell Biology, 211(4), 765–774.

[2] Cadart, C et al. (2017). Methods in Cell Biology, 139,103-120.

細(xì)胞被均勻地限制/壓縮在兩個(gè)亞微米分辨率的兩個(gè)平行表面之間。不同的限制高度（例如1um – 300um），允許長(zhǎng)期細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞增殖，同時(shí)保持對(duì)封閉的控制
與高分辨率光學(xué)顯微鏡系統(tǒng)兼容，可以處理足夠多的細(xì)胞以進(jìn)行完整的基因表達(dá)分析，可與生物功能化的微結(jié)構(gòu)化底物和/或不同的基質(zhì)（幾何形狀控制）結(jié)合使用
可以與凝膠結(jié)合（硬度控制），兼容任何細(xì)胞培養(yǎng)底物（培養(yǎng)皿至96孔板）.

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