ECT001 DNA流式細胞儀試劑ECT0011.0ECT001

DNA流式細胞儀試劑ECT0011.0ECT001

DNA流式細胞儀試劑ECT0011.0ECT001

細胞活力染色：一步，即可使用。使用碘化丙啶，可通過膜滲透快速殺死死細胞。

用于流式細胞術的DNA標準：基于鱒魚紅細胞（TRBC）的DNA標準，該標準無毒且針對流式細胞術進行了優(yōu)化。

核隔離培養(yǎng)基（NIM）：從細胞，組織，凍融的組織或脫脂的/酶分離的組織中分離完整的細胞核。

技術指標

文獻資料

建議的協(xié)議

細胞生存力染色劑：將100uL細胞生存力染色劑與100uL細胞以1x10 ^ 5-1x10 ^ 6細胞/ mL的比例混合）

用于流式細胞術的DNA標準液：以1-2x10 ^ 6細胞/ mL的濃度將50uL的DNA標準液添加到1mL的細胞中。離心成沉淀并重懸于僅NIM（定制染色），NIM-DAPI或NIM-PI中。或者，可以將部分DNA標準品和細胞直接添加到1 mL NIM溶液中，并進行染色，無需離心。分析前，應將懸浮液在冰或室溫下放置2-3分鐘。

核分離培養(yǎng)基（NIM）：與DNA標準品（參見上文）一起，將離心沉淀重懸于100uL僅NIM（用于定制染色），NIM-DAPI或NIM-PI中。或者，可以將部分DNA標準品和細胞直接添加到1 mL NIM溶液中，并進行染色，無需離心。分析前，應將懸浮液在冰或室溫下放置2-3分鐘。

數(shù)據(jù)

具有TRBC DNA標準和核隔離介質(zhì)（NIM-DAPI）的扁桃體

將DNA標準品與NIM-DAPI混合，并通過37µm過濾器過濾。用于建立流式細胞儀的DNA標準在CV = 1-2％的范圍內(nèi)運行。其次，在樣品運行期間，DNA標準品在通道50（約5.0 pg /核）處達到峰值。通過使用人類扁桃體確定CV = 2-3％，G0扁桃體核的相對DNA值為7.4 pg /核，使用通道50中的位置來確保對位酶起作用。對照石蠟化的人扁桃體組織也進行了脫蠟和酶解，以確保PARA試劑功能正常。每次確定良性和癌性組織的DNA直方圖測量值時，所有扁桃體對照均為CV = 2-3％。另外，所有DNA標準樣品的CV = 1-2％。（A）典型的DNA標準鱒魚紅細胞（TRBC）值。CV ＝ 1.42±0.19SD，n ＝ 66。（B）具有DNA標準的人類扁桃體。22個樣品的數(shù)據(jù)得出的平均變異系數(shù)為2.18±0.46 SD，平均DNA指數(shù)為1.42±0.03 SD，平均S相分數(shù)為4.37±1.37 SD。

改編自： Thornthwaite，JT等。J.實體瘤3：12-23（2013）。

提供者

來自西田納西州癌癥研究所