Calypso II Calypso生物大分子相互作用分析儀

 Calypso生物大分子相互作用分析儀是一個(gè)以組分-梯度多角度光散射（CG-MALLS）為基礎(chǔ)的生物大分子間相互作用分析系統(tǒng)，可以快速、自動(dòng)、無損、定量的表征大分子間的相互作用，具有重復(fù)性高、靈敏度高及無需樣品修飾等諸多優(yōu)點(diǎn)。該系統(tǒng)可以分析分子間的特異性及非特異性相互作用，聚集或解離的動(dòng)力學(xué)等。對(duì)于分子間的特異性相互作用，Calypso可以測定其自聚作用及不同樣品分子間的異聚作用，得到平衡解離常數(shù)Kd及反應(yīng)的化學(xué)計(jì)量數(shù)。對(duì)于非特異性相互作用，可以測定其維力系數(shù)，并判斷分子間的作用力及強(qiáng)度。此外，Calypso還可以測定反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)，樣品的重均分子量及均方根半徑等重要分子信息。

    Calypso分析系統(tǒng)無需對(duì)樣品進(jìn)行修飾（熒光標(biāo)記、固定化等），且在溶液環(huán)境中測量，因此可以大程度的保證樣品的天然狀態(tài)，從而得到其他技術(shù)難以得到的結(jié)果，真實(shí)的表征生物大分子間的相互作用，樣品方便回收。

Calypso分析系統(tǒng)的工作原理：組分-梯度多角度光散射（CG-MALS）是新的分析技術(shù)之一，利用分子量的變化測定分子間的相互作用。溶液中大分子的散射光強(qiáng)依賴于物質(zhì)的濃度C和重均分子量Mw，分子間發(fā)生復(fù)合，Mw則增加。例如，若所有的蛋白質(zhì)分子以二聚體形式出現(xiàn)，則散射光強(qiáng)也會(huì)增倍。對(duì)于可逆的聚集，蛋白與單體蛋白復(fù)合的比例會(huì)達(dá)到一個(gè)平衡值，這個(gè)值依賴于每種蛋白初始的濃度和緩沖液的條件。不同的組成和濃度會(huì)導(dǎo)致Mw不同。通過分析一系列不同組成和濃度的光散射結(jié)果，可以確定所發(fā)生的聚集形式、各自的結(jié)合親和力Ka、結(jié)合和解離平衡常數(shù)。手動(dòng)配制比例及測量是一項(xiàng)繁瑣、費(fèi)時(shí)間且容易產(chǎn)生操作誤差的工作，Calypso系統(tǒng)通過自動(dòng)化的過程克服了CG-MALS手動(dòng)操作的困難，將樣品配制、輸送及數(shù)據(jù)的采集和分析集合于一體，完美的保證了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性，并解決了人工配制樣品時(shí)引入操作誤差的問題。
 
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
1. 智能化配樣，消除了手動(dòng)配樣時(shí)的誤差問題；
2. 樣品直接測試，無需標(biāo)記化或固定化，大程度的保證了樣品的天然狀態(tài)；
3. 快速的測定時(shí)間，半小時(shí)即可測得實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
4. 適用于各類生物反應(yīng)體系的測定；
5. 體系中自聚及不同樣品分子異聚的分析；
6. 化學(xué)計(jì)量點(diǎn)，平衡常數(shù)的分析，平衡常數(shù)范圍：pM – mM；
7. 反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的分析；
8. 與激光檢測器、濃度檢測器聯(lián)用，快速測定物質(zhì)的Mw、Rg、A2、A3；獲取Zimm圖；
 
 Calypso生物大分子相互作用分析儀應(yīng)用領(lǐng)域：
1. 酶反應(yīng)體系：酶與抑制劑的相互作用，酶促動(dòng)力學(xué)等
2. 藥物探索：藥物對(duì)蛋白質(zhì)間相互作用的影響等
3. 免疫研究：抗原/抗體的相互作用等
4. 方法改進(jìn)：測定及調(diào)整第二維力系數(shù)，幫助純化抗體，確定多聚體的組成，確定樣品的優(yōu)溶解條件等。
5. 結(jié)合特異性：化學(xué)計(jì)量點(diǎn)，平衡常數(shù)，離子強(qiáng)度、pH或者輔料對(duì)多聚物或者蛋白結(jié)合的影響等。
6. 多分子復(fù)合物的結(jié)構(gòu)分析：在一系列緩沖溶液、時(shí)間、溫度變化下，表征大分子聚集過程中分子間的結(jié)合強(qiáng)度，以及確定其化學(xué)計(jì)量關(guān)系，通過Mw及Rg判斷其空間構(gòu)型。