供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50/100/500 |
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貨號(hào) | MK0102 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
主要用途 | 用于核酸的提取、富集、純化等步驟。其處理后的產(chǎn)物用于臨床體外檢測(cè)使用。 主要用 |
免裂解核酸提取試劑(磁珠法)
【免裂解核酸提取試劑(磁珠法)用途】
用于核酸的提取、富集、純化等步驟。其處理后的產(chǎn)物用于臨床體外檢測(cè)使用。
主要用于拭子樣本及唾液樣本中病毒核酸的提取、富集、純化等,處理后得到的核酸可用于常規(guī)的分子檢測(cè)。
專門配套本公司滅活型病毒采樣管產(chǎn)品。
MT0501-2 | MT0501-7-3 | MT0501-7-6 | MT0501-8 |
【免裂解核酸提取試劑(磁珠法)包裝規(guī)格與組成成分】
試劑名稱 | 50人份/盒 (MK0102-50) | 100人份/盒 (MK0102-100) | 500人份/盒 (MK0102-500) | |||
規(guī)格 | 數(shù)量 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | |
磁珠懸浮混合液 | 1mL/管 | 1 | 2mL/管 | 1 | 10mL/管 | 1 |
純化液(W液) | 8mL/管 | 1 | 8mL/管 | 2 | 80mL/管 | 1 |
洗脫液 | 10mL/管 | 1 | 20mL/管 | 1 | 100mL/管 | 1 |
磁珠懸浮混合液 | 純化液(W液) | 洗脫液 |
【儲(chǔ)存條件及有效期】
運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸。儲(chǔ)存條件:磁珠懸浮混合液應(yīng)置于2℃~8℃保存,其余組分于5℃~30℃保存。有效期12個(gè)月。
【樣本要求】
采用本公司滅活采樣管產(chǎn)品采集后的拭子樣本及唾液樣本,于室溫條件下保存不超過48小時(shí),置于-80℃可*保存。
【免裂解核酸提取試劑(磁珠法)使用方法】
【檢驗(yàn)方法】
1、自備試劑
對(duì)應(yīng)各包裝規(guī)格所需自備的異丙醇與無水乙醇用量參見下表:
規(guī)格 | 50人份/盒 | 100人份/盒 | 500人份/盒 |
異丙醇 | 15mL | 30mL | 150mL |
無水乙醇 | 32mL | 64mL | 320mL |
注意:使用前請(qǐng)務(wù)必先在純化液(W液)中加入無水乙醇,并做好添加標(biāo)記,加入體積請(qǐng)參照上表。
2、樣本前處理(以單人份為例)
1)唾液樣本處理:
a. 采用滅活采樣液采集完唾液樣本運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室之后,取出300μL樣本加至一個(gè)無RNA酶的1.5mL離心管中,再向其中加入300μL的異丙醇;
b. 向上述離心管中加入20μL磁珠懸浮混合液,并渦旋振蕩30秒進(jìn)行充分混合。
c.室溫孵育5分鐘,期間上下顛倒混勻3-5次。
2)拭子樣本處理:
a.將采集的拭子樣液連同拭子一起渦旋振蕩1分鐘,使拭子上粘附的樣本被充分洗脫下來。
b. 取出300μL洗脫后的樣液加至一個(gè)無RNA酶的1.5mL離心管中,再加入300μL的異丙醇。
c.向上述離心管中加入20μL磁珠懸浮混合液,渦旋振蕩30秒以充分混勻。
d.室溫孵育5分鐘,期間上下顛倒混勻3-5次。
3、將上述離心管置于磁力架上進(jìn)行磁分離:離心管置于磁力架后,靜置2分鐘,期間每30秒輕輕地顛倒磁力架一次,使管蓋上的磁珠也聚集到管壁。吸去磁珠以外的液體,避免吸到磁珠。
4、從磁力架上取下離心管,加入800μL 純化液(W液)(使用前檢查是否已加入無水乙醇),渦旋混勻20秒后進(jìn)行磁分離,吸去磁珠以外的液體,避免吸到磁珠。用量程為10μL或者20μL的移液器吸去殘留在管壁上較大的液滴。
5、將管蓋打開,在超凈工作臺(tái)中晾干磁珠,晾3分鐘為宜,如管底仍有肉眼可見的液體殘留,用量程為10μL或者20μL的移液器將其吸去。
6、取下離心管,加入100μL洗脫液,吹吸混勻使磁珠充分懸浮后于室溫孵育5分鐘,期間輕輕渦旋2-3次以懸浮磁珠。
7、將離心管置于磁力架上進(jìn)行磁珠分離,吸取磁珠以外的液體于無RNA酶的1.5mL離心管中,避免吸到磁珠,得到的核酸溶液用于后續(xù)檢測(cè)或置于-70℃*保存。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1、外觀
1.1 包裝標(biāo)簽
包裝完整無破損,標(biāo)簽清晰,液體無泄漏。
1.2顏色和澄清度
磁珠懸浮混合液,渾濁狀態(tài)時(shí)為黑褐色混合液體,分層狀態(tài)時(shí),上層為無色液體,下層為黑褐色固體沉淀;洗脫液、純化液(W液)均為澄清無色液體。
2、提取靈敏度
靈敏度為500 copies/mL。采用本品提取濃度為500 copies/mL的病毒樣本核酸,熒光定量PCR結(jié)果呈現(xiàn)陽(yáng)性。
3、核酸CV值
重復(fù)提取核酸濃度的變異系數(shù)(CV)應(yīng)不大于5%。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
提取液體樣本的體積應(yīng)控制在300μL±10μL。
相同病毒濃度下,友康產(chǎn)品可以得到更高的核酸濃度
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
分別用友康生物免裂解病毒核酸提取試劑和三家國(guó)內(nèi)(A品牌、B品牌以及C品牌)常規(guī)病毒核酸提取試劑同時(shí)提取同一支同濃度 豬流行性腹瀉病毒(PEDV)*的 RNA,然后采用熒光定量PCR進(jìn)行檢測(cè)。
低濃度組:1×105 copies/mL
品牌 | Ct | 品牌 | Ct | 品牌 | Ct |
友康 | 22.27 | 友康 | 22.27 | 友康 | 22.27 |
A品牌 | 23.64 | B品牌 | 22.93 | C品牌 | 22.57 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
在相同的病毒濃度下(病毒濃度為1×105copies/mL),友康免裂解病毒核酸提取試劑與A、B、C三個(gè)品牌常規(guī)病毒核酸提取試劑相比,Ct值較低。
結(jié)論:友康免裂解病毒核酸提取試劑 提取性能優(yōu)于其他品牌產(chǎn)品。
高濃度組:5×108 copies/mL
品牌 | Ct | 品牌 | Ct | 品牌 | Ct |
友康 | 13.44 | 友康 | 12.97 | 友康 | 13.24 |
A品牌 | 18.84 | B品牌 | 18.94 | C品牌 | 18.26 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
在相同的病毒濃度下(病毒濃度為5×108copies/mL),友康免裂解病毒核酸提取試劑與A、B、C三個(gè)品牌常規(guī)病毒核酸提取試劑相比,Ct值平均低5.4左右。
結(jié)論:友康免裂解病毒核酸提取試劑 提取性能顯著優(yōu)于其他品牌產(chǎn)品。
* PEDV,豬流行性腹瀉病毒,為冠狀病毒科冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒,病毒基因組為單股正鏈RNA病毒,有囊膜。病毒的基因組大小與結(jié)構(gòu)組成均與冠狀病毒相近,適合用作實(shí)驗(yàn)材料。