AP12L015 Bradford蛋白定量試劑盒
| 參考價(jià) | ￥ 128 |
| 訂貨量 | ≥1件 |
- 公司名稱(chēng) 和元李記（上海）生物技術(shù)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) AP12L015
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/9 11:19:41
- 訪問(wèn)次數(shù) 1626
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胎牛血清，轉(zhuǎn)染試劑（高效），凍存液（普通），cck-8，1640培養(yǎng)基，PBS液體，凋亡試劑盒，熒光素鉀鹽，蛋白Mark，發(fā)光液（超敏），快速封閉
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | AP12L015 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 通過(guò)檢測(cè)595nm的光吸收值的大小來(lái)計(jì)算蛋白的含量 |
產(chǎn)品描述
Bradford 法蛋白定量是基于考馬斯亮藍(lán)G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合后， 產(chǎn)生藍(lán)色化合物，反應(yīng)迅速而穩(wěn)定。反應(yīng)化合物在465-595nm處有大的光吸收值，化合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關(guān)系，因此可通過(guò)檢測(cè)595nm的光吸收值的大小來(lái)計(jì)算蛋白的含量。
訂購(gòu)信息
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
| Bradford蛋白定量試劑盒 | AP12L015 | 500 T | 128 |
產(chǎn)品組分
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品組成 | 包裝規(guī)格 |
| AP12L015 | Bradford試劑 A | 100 mL |
| 蛋白標(biāo)準(zhǔn)（5mg/ml BSA） | 1 mL | |
| 說(shuō)明書(shū) | 一份 |
保存方法
冰袋運(yùn)輸，Bradford試劑A 2-8°C保存，蛋白標(biāo)準(zhǔn)品-20°C保存，保質(zhì)期一年。
使用方法
方案一、試管檢測(cè)
1、試劑準(zhǔn)備
（1）取適量5mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)，PBS稀釋至終濃度為2mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)。配制后可立即使用，也可以-20°C長(zhǎng)期保存。
（2）稀釋BSA標(biāo)準(zhǔn)品：用與待測(cè)蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋BSA標(biāo)準(zhǔn)品。
表1：BSA標(biāo)準(zhǔn)品配制表
| 標(biāo)準(zhǔn)品編號(hào) | 稀釋液體積μl | 標(biāo)準(zhǔn)品用量μl | 標(biāo)準(zhǔn)品濃度μg/ml |
| 1 | 0 | 100 | 2000 |
| 2 | 50 | 150 | 1500 |
| 3 | 200 | 200 | 1000 |
| 4 | 200 | 200(從3號(hào)管中取) | 500 |
| 5 | 200 | 200(從4號(hào)管中取) | 250 |
| 6 | 200 | 200(從5號(hào)管中取) | 125 |
| 7 | 200 | 0 | 0 |
（3）取干凈的試管，將30μl稀釋好的BSA標(biāo)準(zhǔn)品分別加到作好標(biāo)記的試管中。
（4）取干凈的試管，分別加入30μl待測(cè)蛋白樣品(原液或稀釋液)，并作好標(biāo)記，推薦每個(gè)樣品做2-3 個(gè)平行反應(yīng)。
2、樣品孵育及檢測(cè)
（1）向上一步驟配制的不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品BSA和待測(cè)樣品試管中各加入1.5ml Bradford蛋白定量試劑，充分混勻，室溫放置10分鐘。
（2）用分光光度計(jì)測(cè)定595nm 處的吸光值。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線和計(jì)算樣品濃度
（1）利用Excel或其他軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算樣品中的蛋白濃度。
（2）如果所得到的蛋白濃度不在檢測(cè)范圍內(nèi)，請(qǐng)重新稀釋樣品后再次測(cè)定。
方案二、微孔檢測(cè)
1、試劑準(zhǔn)備
（1）將按表2稀釋好的BSA標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)蛋白樣品（原液或稀釋液）各5μl分別加到作好標(biāo)記的96孔板微孔中。推薦每個(gè)樣品做2-3 個(gè)平行反應(yīng)。
表2：BSA標(biāo)準(zhǔn)品配制表
| 標(biāo)準(zhǔn)品編號(hào) | 稀釋液體積μl | 標(biāo)準(zhǔn)品用量μl | 標(biāo)準(zhǔn)品濃度μg/ml |
| 1 | 0 | 20 | 2000 |
| 2 | 10 | 30 | 1500 |
| 3 | 40 | 40 | 1000 |
| 4 | 40 | 40(從3號(hào)管中取) | 500 |
| 5 | 40 | 40(從4號(hào)管中取) | 250 |
| 6 | 40 | 40(從5號(hào)管中取) | 125 |
| 7 | 40 | 0 | 0 |
2、樣品孵育及檢測(cè)
（1）每孔加入250μl Bradford蛋白定量試劑，充分混勻，蓋上96孔板蓋，室溫放置10 分鐘。
（2）用酶標(biāo)儀測(cè)定595nm處的吸光值。
3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線和計(jì)算樣品濃度
（1）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中的蛋白濃度。
（2）如果所得到的蛋白濃度不在檢測(cè)范圍內(nèi)，請(qǐng)重新稀釋樣品后再次測(cè)定。
注意事項(xiàng)
1、樣品中若含有去垢劑會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果，請(qǐng)?jiān)囉?BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒；
2、要得到更為準(zhǔn)確的蛋白濃度結(jié)果，每個(gè)蛋白梯度和樣品均需做復(fù)孔, 每次均應(yīng)做標(biāo)準(zhǔn)曲線；
3、需準(zhǔn)備 37°C水浴或溫箱、酶標(biāo)儀或普通分光光度計(jì)，測(cè)定波長(zhǎng)為 465-595nm 之間，595nm合適。酶標(biāo)儀需與 96孔酶標(biāo)板配套使用。使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí)，試劑盒測(cè)定的樣品數(shù)量會(huì)因此而減少。使用溫箱孵育時(shí)，應(yīng)注意防止因水份蒸發(fā)影響檢測(cè)結(jié)果。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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