MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒

中文名稱：MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒

英文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500次

發(fā)貨周期：1～3天

產(chǎn)品特點：

1．本試劑盒是單溶液式細胞增殖與細胞毒性檢測試劑，主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑，溶液的穩(wěn)定性強，反應(yīng)的靈敏度高。

2．操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時，無需洗滌或收獲細胞，免去溶解步驟。

3．無放射性。不需要配制液閃混合物，也不需要處理廢棄物。

4．與MTT相比，使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

5．操作靈活，與MTT不同，平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育，使顏色進一步生成。

儲存條件：低溫運輸，-20℃避光保存，有效期半年。

使用效果：

96孔板中加入細胞100μL/孔(約1×104)，37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時，加入適當(dāng)濃度的受試化合物。培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間，每孔中加入10μL的MTS細胞增殖及毒性檢測溶液。37℃孵育1-4小時。490nm波長檢測光密度。

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

HCT116, 人結(jié)直腸癌細胞 Human

LncaP, 人前列腺癌細胞 Human

6-10B, 人鼻咽癌細胞系 Human

lovo, 人結(jié)腸癌細胞 Human

DU 145, 人前列腺癌細胞 Human

Hep-2, 人喉癌細胞系 Human

MDA-MB-231, 人乳腺癌細胞 Human

HL-60, 人早幼粒白血病細胞 Human

CaEs-17, 人食管癌細胞株 Human

MG-63, 人骨肉瘤細胞 Human

kasumi-1, 人白血病細胞株 Human

RBE, 人肝膽管癌細胞 Human

MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞 Human

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 Human

QGY-7701, 人肝癌細胞 Human

PANC-1, 人胰腺癌細胞 Human

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 Human

Hep G2, 人肝癌細胞系 Human

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化) Rattus

ARPC4肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型4抗體

ARSI芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體

ART1抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體

ARVCF精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體

ALDH1乙醛脫氫酶1型抗體

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser80)磷酸化乙酰羧化酶抗體

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263)磷酸化乙?；缚贵w

phospho-ABCA1 (Ser2054)磷酸化腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體

phospho-Aconitase 1 (Ser138)磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體

phospho-Aconitase 1 (Ser711)磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase beta (Ser220)磷酸化乙酰酶抗體

Annexin VI膜粘連蛋白6抗體

ANKRD42錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體

Anillin胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體

MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒Adenovirus 5 E1A binding protein腺病毒5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1)

APOA1載脂蛋白A1抗體

ATG16L自噬相關(guān)蛋白16A抗體

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)