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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>生化試劑>其它生化試劑> 反轉(zhuǎn)錄試劑盒(一管化去基因組三代酶)

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反轉(zhuǎn)錄試劑盒(一管化去基因組三代酶)

參考價 350.00-1300.00
具體成交價以合同協(xié)議為準
規(guī)格
20T350.00元9999 件 可售
100T1300.00元9999 件 可售

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北京蘭博利德商貿(mào)有限公司,成立于2007年。 專業(yè)從事生命科學方面的服務,為客戶提供試劑、耗材、儀器等產(chǎn)品,主要涵蓋生物化學、分子生物學、細胞生物學、微生物學、植物學、免疫學、免疫診斷、分子診斷等領(lǐng)域。


我公司有一支具有高度專業(yè)化的團隊,主要成員都來自于生物消耗品行業(yè)的的企業(yè),有多年的從業(yè)經(jīng)驗,可以為客戶提供標準化、專業(yè)化的服務。同時,生物行業(yè)的專家為我公司的發(fā)展提供戰(zhàn)略發(fā)展方面的資訊。


蘭博利德的企業(yè)使命 — 助力生物科研,促進生物科技發(fā)展!

 

蘭博利德的核心價值— 誠信、共贏、團結(jié)、專注!

 

 

 

 

生命科學產(chǎn)品、生化試劑、實驗室耗材等

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T,100T
貨號 F0202

All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase)

貨號F0202

儲存條件-20℃

產(chǎn)品組分

規(guī)格

All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix

400ul

dsDNase

50ul×2

10×dsDNase Buffer

200ul

Nuclease-Free Water

1ml×2

產(chǎn)品簡介

All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix是一款高效、便捷、減少污染的高質(zhì)量一鏈cDNA合成試劑盒,包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase及其反應Buffer、RNA酶抑制劑、dNTPs, Oligo(dT)20VN和隨機引物等一鏈cDNA合成所需的所有組分,僅需加入RNA模板和水即可開始反應。使用該逆轉(zhuǎn)錄試劑盒獲得的cDNA,下游可用于qPCR、普通PCR等實驗。

本試劑盒采用dsDNase高效去除基因組DNA污染,區(qū)別于常規(guī)的DNase l, dsDNase 能夠特異性的消化雙鏈DNA (dsDNA以及DNA與RNA的雜合鏈),并且具有熱敏感性,可在高溫條件下快速不可逆地失活。與傳統(tǒng)使用DNase l去除基因組DNA污染的方法相比,dsDNase無需額外加入EDTA進行失活,不僅節(jié)省實驗時間,而且降低了對逆轉(zhuǎn)錄反應的抑制。All-in-OneFirst-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase)作為升級后的一鏈cDNA合成試劑盒,15分鐘內(nèi)最長可獲得12 kb cDNA。

可依據(jù)基因組污染嚴重程度選擇采用去基因組DNA污染與反轉(zhuǎn)錄分開進行的操作方法,或者去基因組污染與反轉(zhuǎn)錄一步法進行的操作方法。

使用方法:

針對基因組含量低的RNA樣品(推薦方案)

于冰上配制如下反應體系

試劑

使用量

模板 RNAa

50 ng~1ug

All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix

4ul

dsDNase

1ul

Nuclease-Free Water

To 20ul

a. 推薦采用試劑盒提取的 RNA 作為模板

② 輕柔吸打混勻,瞬離;

③ 37℃溫育2min,以去除基因組DNA污染;

④ 55℃溫育15 min;

⑤ 反應結(jié)束后,85℃溫育5 min以終止反應;注:若RNA中基因組DNA污染嚴重,可適當延長37℃溫育時間至5 min。

⑥ 迅速將獲得的 cDNA置于冰上,用于后續(xù)實驗;或立即保存于-20°C。

針對基因組含量高 RNA 樣品

1. 基因組 DNA 污染去除

①于冰上配制如下反應體系:

試劑

使用量

模板 RNAa

50 ng~1ug

10x DNase buffer

1ul

dsDNase

1ul

Nuclease-Free Water

To 10ul

a. 推薦采用試劑盒提取的RNA作為模板。

② 輕柔吸打混勻,瞬離;

③ 37°℃溫育2 min,以去除基因組DNA污染;

:若RNA中基因組DNA污染嚴重,可適當延長37℃溫育時間至5 min。

④ 65℃溫育2 min,使dsDNase失活,冰上放置。

2. First-Strand cDNA合成

于冰上配制如下反應體系

試劑

使用量(實驗組)

“實驗 1”反應產(chǎn)物

10 μl

All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix

4 μl

Nuclease-Free Water

To 20 μl

② 輕柔吸打混勻,瞬離;

③ 50℃溫育15min;

注:若目標RNA不含Poly(A)結(jié)構(gòu),可預先25℃溫育10min。

④ 反應結(jié)束后,85℃溫育5min,以終止反應;

⑤ 將獲得的 cDNA 溶液置于冰上,用于后續(xù)實驗。

注:cDNA溶液置于-20℃儲存,建議不超過1周;置于-80℃可長期儲存。

注意事項

預混液中已經(jīng)包含Oligo(dT)20VN和隨機引物,不僅適用于包含Poly(A)結(jié)構(gòu)的真核生物mRNA,也適用于不含Poly(A)結(jié)構(gòu)的原核生物RNA、真核生物rRNA和tRNA等模板,但不適用于miRNA等小RNA模板。






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