Elisa檢測技術(shù)
- 公司名稱 伊萊博生物科技(上海)有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2023/10/30 16:46:47
- 訪問次數(shù) 637
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實(shí)驗(yàn)過程
(1)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:標(biāo)準(zhǔn)品按照說明書稀釋好五個梯度,各個梯度每孔加樣量都為50μL;
(2)加樣:分別設(shè)空白孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40uL,然后再加待測樣品10uL。加樣將樣品加干酶標(biāo)板孔底部,盡最不觸及孔壁,輕輕晃動混勻;
(3)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30min ;
(4)配液洗滌:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜詈30sec后棄去,如此重復(fù)5次,拍干:
(5)加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50uL,空白孔除外;
(6)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30min ;
(7)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30sec后棄去,如此重復(fù)5次,拍干;
(8)顯色:每孔先加入顯色劑A50pL,再加入顯色劑B50uL,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15min;
(9)終止:每孔加終止液50uL,終止反應(yīng);
(10)測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測是各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15min以內(nèi)進(jìn)行。