流式鈣離子濃度檢測(cè)技術(shù)服務(wù)

流式鈣離子濃度檢測(cè)技術(shù)服務(wù)1、鈣熒光探針負(fù)載;取細(xì)胞懸液，加Fluo-3-Am至10umol/L，置二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育1h，其間輕微振蕩3次。離心，去掉多余的染料，再用無(wú)鈣緩沖液反復(fù)洗滌3次，最后用無(wú)鈣緩沖液稀釋。

2、隨機(jī)測(cè)定每管細(xì)胞懸液樣品(以下簡(jiǎn)稱樣品)的單個(gè)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度，記為F值，

3、加入10%TritonX100，(破膜用):加入1mmol兒氯化鈣，吹打均勻，解育1~10min.測(cè)定熒光即Fmax佰

4、加入EDTA，20ul(鈣鰲合劑)，孵育1~10min，激發(fā)波長(zhǎng)488nm測(cè)定熒光.即Fmin值，加0.1%friton是增加膜通透性使細(xì)胞外Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，作為最大值。加EGTA是為了螯合Ca2+，作為最小值生理環(huán)境中細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度遠(yuǎn)低干細(xì)胞外液(大約1:10000)，細(xì)胞膜對(duì)鈣的通透性變化對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣影響很大流式細(xì)胞術(shù)是一種高靈敏度的自動(dòng)分析細(xì)胞的高新技術(shù)，快速而大量地檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞是它的一大特點(diǎn)，用流式細(xì)胞術(shù)可以擯棄原子吸收光譜法測(cè)定組織鈣不能區(qū)別細(xì)胞內(nèi)外Ca2+含最之不足，也不似其他方法操作過干繁雜，由干流式細(xì)胞術(shù)一次測(cè)量細(xì)胞數(shù)量大，故測(cè)定結(jié)果較為準(zhǔn)確，誤差小。更由于在活的細(xì)胞中進(jìn)行測(cè)定，極有助于生命科學(xué)中Ca2+的研究，

流式鈣離子濃度檢測(cè)技術(shù)服務(wù)

我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測(cè)、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分、較好的的服務(wù)平臺(tái)，為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前，及，涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。