雞腎小管上皮細胞

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產(chǎn)品名稱：雞腎小管上皮細胞

組織來源：腎組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡介：

雞腎小管上皮分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)，于腎小體附近高度蟠曲；遠端小管曲部也稱為遠曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞，腎小管上皮細胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項重要技術(shù)，目前該分離方法有酶分離法、化學分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能：①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進入終尿；③細胞能分泌炎癥介質(zhì)如細胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應(yīng)；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對腎間質(zhì)纖維化機制研究的日漸加深，腎小管上皮細胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細胞模型，在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的

方法簡介：

公司實驗室分離的雞腎小管上皮采用篩網(wǎng)過濾、膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的雞腎小管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠腦肽   英文名稱：   brainnaiureticpep tid   規(guī)格：      英文縮寫：   BNP

小鼠N端前腦素   英文名稱：   N-terminal pro-brain naiuretic peptide   規(guī)格：      英文縮寫：   -proBNP

小鼠骨唾液酸蛋白   英文名稱：   bone sialoprotein   規(guī)格：      英文縮寫：   BSP

小鼠尿素氮   英文名稱：   Mouse Blood Urea Niogen   規(guī)格：      英文縮寫：   BUN

小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human guanine nucleotide dissociation inhibitor (GDI) ELISA Kit 人鳥苷酸解離抑制因子(GDI)試劑盒

Humangalanin,GALELISAKit 人甘肽/甘素(GAL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

guineapigLeukoieneB4,LT-B4試劑盒豚鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞壁可溶性總蛋白制備試劑盒20次

Mousecalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

RNA核酸外切酶同源蛋白2抗體

甲型流感病毒血凝素抗體

DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 標簽) Protein

p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原 0.5mgp38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原)

NETO1重組人 NETO1 / BTCL1 蛋白 Protein

CRABP1 Protein Human 重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白

FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白

p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原 0.5mgp38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原)

CRABP1 Protein Human 重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白

DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 標簽) Protein

FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白

NETO1重組人 NETO1 / BTCL1 蛋白 Protein

雞腎小管上皮細胞大鼠補體片斷5(C5)試劑盒 ，英文名： C5 ELISA Kit

Mouse TGF- beta inducible early gene 1 (TIEG1) ELISA Kit 小鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)試劑盒

ELISA 小鼠β內(nèi)啡肽(mouse β-EP)  進口分裝

CLIAKitforLambda-IgLC(Humanlambdaimmunoglobulinlightchain)ELISAKit輕鏈lambda

通用型WNV(WESTNILE)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitC3鮭魚補體蛋白3