ATP含量測試盒微量法

商品屬性：

測定意義：

ATP 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測定 ATP 含量并且計(jì)算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。 

測定原理：

肌酸激酶催化肌酸和 ATP 反應(yīng)生成磷酸肌酸，可在 700nm 下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量，以此反應(yīng) ATP 含量。 

自備儀器和用品：

酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、96 孔板、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 2.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存；

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 1.2mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

試劑四：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑五：液體 25mL×1 瓶，4℃保存；

標(biāo)準(zhǔn)液：液體 10mL×1 瓶，0.5μmol/mLATP 標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存；

組織樣本的前處理：

1、組織中 ATP 的提?。悍Q取約 0.1g 樣本，加入 1mL 蒸餾水，冰浴勻漿，100℃加熱提取 5min， 8000g 4℃ 離心 15min，取上清液待測。

2、細(xì)胞或細(xì)菌中 ATP 的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù) 量（10 4個）：蒸餾水（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 蒸餾 水），超聲波破碎 1min（冰浴，強(qiáng)度 20％或 200W，超聲 2s，停 1s），8000g 4 ℃離心 15min； 取上清液待測。

3、血清（漿）中 ATP 的提?。喝〖s 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 蒸餾水，冰浴勻漿，100℃ 加熱提取 5min，8000g 4℃ 離心 15min，取上清液待測。

測定步驟：

1、酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到 700nm，蒸餾水調(diào)零。

2、顯色劑的配制：臨用前請根據(jù)擬用顯色劑體積（樣本數(shù)×0.2 m L），按試劑四(mL)：試劑五（mL）=1：5 的比例配制。用多少配多少。

3、樣本測定：

試劑名稱(μL) 測定管 標(biāo)準(zhǔn)管 空白管

樣本 10

標(biāo)準(zhǔn)液 10 10

試劑一 20 20

試劑二 10 10 10

試劑三 10 10

蒸餾水 30

充分混勻，37℃準(zhǔn)確水浴 30min

顯色劑 200 200 200

37℃水浴 20min 后，700nm 下測定各管吸光值

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管通常只需要各做一個。

ATP 含量計(jì)算：

1、血清（漿）中 ATP 含量計(jì)算

ATP 含 量 (μmol/mL)=[C 標(biāo) 準(zhǔn) 管 ×(A 測 定 管 － A 空 白 管 )÷(A 標(biāo) 準(zhǔn) 管 － A 空 白 管 ) ×V1]÷(V3×V1÷V2)=5×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 ATP 含量計(jì)算

（1）按蛋白濃度計(jì)算

ATP 含 量 (μmol/mg prot)=[C 標(biāo) 準(zhǔn)管 ×(A 測 定管 －A 空 白管 )÷(A 標(biāo) 準(zhǔn)管 －A 空 白管 ) ×V1]÷(V1÷Cpr）=0.5×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷Cpr蛋白質(zhì)含量需要另外測定。 （2）按樣本鮮重計(jì)算

ATP 含 量(μmol/g 鮮 重)=[C 標(biāo) 準(zhǔn) 管 ×(A 測 定 管 －A 空 白 管)÷(A 標(biāo) 準(zhǔn) 管 － A 空 白 管) ×V1]÷(W×V1÷V2)=0.5×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

ATP 含量(μmol/10

4 cell）=[C 標(biāo)準(zhǔn)管×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管) ×V1]÷(500×V1÷V2)=0.001×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)液濃度，0.5μmol/mL；V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01mL；V2：加入提取液體積，1mL；V3：加入血清（漿）體積：0.1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL； W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬。

注意：低檢測限為 10nmol/mL 或 10nmol/g 鮮重或 0.1nmol/mgprot

生化檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明：

一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性（GOD）檢測、總抗氧化能力（TAC）檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚（TP）含量檢測試劑盒。

氧化酶（XO）活性分析試劑盒為例，提供了一種簡單易用的比色分析法，用于測定各種樣品中的XO活性，特點(diǎn)是測定血清，血漿，組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性，以及廣泛的檢測范圍：15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫（H2O2）檢測、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒（比色法）為例，提供了一種簡單易用的比色法，用于分析不同生物樣品（細(xì)胞/組織裂解液，生物液體）中蛋白質(zhì)羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

特點(diǎn)是：1.測定組織樣本、細(xì)胞、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量。2.樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長。

三、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例，提供一種簡單易用的比色測定法，用于定量測定血清，血漿，組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點(diǎn)是：1.測定血清，血漿，組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性，zui大抑制率可接近100％，不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍：3.13- 200U/mL。

公司正在出售的產(chǎn)品：