SPRm 200 系列 細(xì)胞原位分子互作成像分析系統(tǒng)

   SPRm 200將表面等離子體共振技術(shù)和光學(xué)顯微鏡巧妙結(jié)合為一體的生物傳感檢測(cè)儀。細(xì)胞原位分子互作成像分析系統(tǒng)為免標(biāo)記研究分子相互作用的領(lǐng)域開辟一個(gè)嶄新的前沿。細(xì)胞原位分子互作成像分析系統(tǒng)專門針對(duì)細(xì)胞膜蛋白和相關(guān)分子免標(biāo)記檢測(cè)而設(shè)計(jì)的SPRm200，使您在不需要從細(xì)胞中提取和分離膜蛋白的前提下實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)并同時(shí)測(cè)量藥物和靶點(diǎn)在細(xì)胞上的結(jié)合過程。還可進(jìn)行對(duì)藥物和在天然狀態(tài)下的膜蛋白之間相互作用的測(cè)量。由于出色的靈敏度和穩(wěn)定性，SPRm200能夠測(cè)量納米尺度上的結(jié)合行為，可用于研究細(xì)菌或病毒與抗菌性藥物的相互作用，以及發(fā)展新型藥物載遞納米顆粒。

  一、主要技術(shù)參數(shù)

  1.工作站

  1.1光源690nm

  1.2入射角40-76Deg(連續(xù))

  1.3檢測(cè)靈敏度<0.6RURMS(0.1mDegRMS)

  1.4漂移指數(shù)3RU/小時(shí)(0.5mDeg/hr)RMS(當(dāng)周圍環(huán)境漂移<1°C/小時(shí))

  1.5溫控范圍15°Cto40°C(降溫限止在低于室溫10°C)

  1.6視場(chǎng)"BrightField:1200x900umSPR:600x450um"

  放大率"BrightField:x10

  SPR:x20"

  1.7分辨率BrightField&SPR:1μm

  1.8樣品臺(tái)平移/旋轉(zhuǎn)3mmx3mm/360deg

  1.9外圍尺寸690(w)x330(h)x340(d)mm

  2.流體操作

  2.1樣品容積1to1500μL(可根據(jù)應(yīng)用需求調(diào)節(jié))

  2.2動(dòng)力學(xué)常數(shù)"ka<1x107m-1s-1kd>1X10-5s-1"

  2.3解離常數(shù)（親和常數(shù)的倒數(shù)）KD=10-3M(1mM)to10-12M(1pM)

  2.4最小可分析的分子量200Da

  3.控制系統(tǒng)

  3.1計(jì)算機(jī)微軟Windows操作系統(tǒng)

  3.2軟件BIImageSPRTM軟件,包括數(shù)據(jù)分析和動(dòng)力學(xué)分析包

  4.自動(dòng)進(jìn)樣器

  4.1試樣容量"最多可載768樣品，可使用多種載盤包括：

  2xSBSstandards(384/96)

  2x48Vials(1.5mL)

  2x12Vials(10mL)"

  4.2注射體積0mLto9999mL

  4.3樣品冷卻控溫:4oC+/-2oC

  5.自動(dòng)緩沖液交換泵

  5.1緩沖液選擇可自動(dòng)更換6種緩沖液

  5.2溶液除氣功能在線除氣

  5.3緩沖液輸送連續(xù)

  二、主要功能

  1.實(shí)時(shí)定量活細(xì)胞分子相互作用

  2.單個(gè)細(xì)胞/多個(gè)細(xì)胞動(dòng)力學(xué)定量分析（Ka，Kd，KD）及統(tǒng)計(jì)分布

  3.明場(chǎng)成像、SPR成像結(jié)合單點(diǎn)動(dòng)力學(xué)分析

  4.生物標(biāo)記檢測(cè),藥物靶向研發(fā)

  5.小分子免標(biāo)分析（<200Da）

  6.電化學(xué)同步分析

  7.小分子、DNA、抗體、肽段、蛋白、病毒、細(xì)菌、細(xì)胞分析

  三、技術(shù)特點(diǎn)

  1.細(xì)胞原位：真正實(shí)現(xiàn)細(xì)胞層面的原位分子互作，無需提純，可以直接原位分析藥物在細(xì)胞層面與分子互作，尤其為膜蛋白受體（糖蛋白、GPCR）等提供了研究解決方案

  2.通量：SPR視場(chǎng)600um*600um，可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)細(xì)胞與分子互作的研究，從而實(shí)現(xiàn)藥物統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，和細(xì)胞異質(zhì)性研究

  3.精度：良好靈敏度，可以實(shí)現(xiàn)<200Da小分子藥物與細(xì)胞的互作研究

  4.高分辨動(dòng)態(tài)可視化：可以動(dòng)態(tài)可視化觀察藥物分子與細(xì)胞反應(yīng)的全過程及成像，同時(shí)可以得到定量的SPR分析曲線，從而得到定量Ka、Kd、KD

  四、主要應(yīng)用

  1.基于原位細(xì)胞分子互作的研究

  1.1小分子藥物

  ①小分子藥物與HEK293細(xì)胞GPR39受體相互作用

  ②小分子藥物與細(xì)胞ASIC酸敏感離子通道受體相互作用研究

  1.2抗體藥物

  單克隆抗體（MAB）療法已成為治療癌癥、自身免疫性疾病、哮喘和許多其他疾病的既定方法。單克隆抗體（MAB）藥物占整個(gè)生物制藥50%的份額，其中超過60%都是膜蛋白受體。SPRm200可以在單細(xì)胞層面定量研究單克隆抗體（MAB）和膜蛋白結(jié)合作用。傳統(tǒng)SPR是直接將純化的蛋白固定在芯片表面，對(duì)于膜蛋白而言是有問題的，膜蛋白從細(xì)胞環(huán)境中提取并保持自身形態(tài)非常困難。

  2.基于病毒、細(xì)菌載體分子互作的研究

  2.1快速ASTs實(shí)驗(yàn)：抗生素與大腸桿菌代謝活性研究

  ASTs實(shí)驗(yàn)是確定抗生素易感性和細(xì)菌菌株耐藥性的重要實(shí)驗(yàn)。目前大多數(shù)AST實(shí)驗(yàn)是基于細(xì)胞培養(yǎng)，需要幾天時(shí)間才能完成?？焖貯ST檢測(cè)可以降低發(fā)病率死亡率和幫助制定早期窄譜抗生素治療方案。通過SPRm200，我們使用等離子成像和PIT技術(shù)跟蹤單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)。監(jiān)測(cè)隨著細(xì)胞代謝和抗生素的投入的Z向變化?？梢钥吹剑股乜梢悦黠@減弱細(xì)菌細(xì)胞的活動(dòng)，并且可以定量計(jì)算，從而成為快速AST檢測(cè)方法。

  3.基于SPRm200，病毒載體微陣列研究多種不同GPCR受體與配體的相互作用的研究

  3.1SPRM電化學(xué)阻抗方法定量檢測(cè)分子互作

  通過電化學(xué)SPRM阻抗分析，測(cè)量了傳感器表面病毒肽配體和不同GPCR受體的結(jié)合動(dòng)力學(xué)常數(shù)