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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>化工原料>生物化工醫(yī)藥>輔料>171831 特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶

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171831 特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶

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UBIO為生物行業(yè)添磚加瓦

 

培養(yǎng)板,培養(yǎng)耗材,培養(yǎng)基

供貨周期 一個月 貨號 171831
應用領域 生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 主要用途 標準品,糖苷合成,抗體修飾、ADC藥物制作

  特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶, ENGase 廣泛應用于需要糖肽、糖蛋白和糖復合物的均質(zhì)糖苷的合成應用中。 治療性單克隆抗體的聚糖重構(gòu)尤其重要,因為聚糖結(jié)構(gòu)影響抗體效應器功能、穩(wěn)定性和藥代動力學/藥效學。

 
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  為了控制Fc-N-聚糖,我們進行了Fc-N-聚糖從異構(gòu)N-糖基化模式重排為用化學酶法與兩種類型的內(nèi)-β-乙?;铣赏|(zhì)N-聚糖氨基葡糖苷酶(ENG’ases),一種作為水解酶切割所有異構(gòu)體的酶N-聚糖,另一種用作糖苷合成酶以產(chǎn)生均勻的N-聚糖。
 
  作為起始材料,我們使用了轉(zhuǎn)基因家蠶中產(chǎn)生的抗Her2抗體
 
  繭,由非巖藻糖基少甘露糖型(Man2-3GlcNAc2)、高甘露糖組成
 
  型(Man4-9GlcNAc2)和復合型(Man3GlcNAc3-4)N-聚糖。因此
 
  幾種ENG’ase(endoS、endoM、endoD、endoH和endoLL)的裂解
 
  抗體上的聚糖通過endoS、endoD和endoLL的組合。接下來,所需的N-聚糖(M3;Man3-
 
  GlcNAc1、G0;GlcNAc2Man3GlcNAc1、G2;Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc1,A2;NeuAc2Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc1)
 
  從相應的惡唑啉轉(zhuǎn)移到具有ENG’ase突變體(endo-S-D233Q)的完整抗Her2抗體上的GlcNAc殘基,并且
 
  獲得了糖工程化的抗Her2抗體。抗Her2抗體的結(jié)合測定具有FcγRIIIa-V158的同質(zhì)N-聚糖表明γRIIIa-V158的親和力。此外,糖工程抗Her2的ADCC測定使用SKBR-3和BT474進行抗體(mAb-M3、mAb-G0、mAb-G2和mAb-A2)并揭示了糖型影響ADCC活性。
 
  特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶
 


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