171831 特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶
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- 公司名稱 上海優(yōu)柏生物科技有限公司
- 品牌 FUSHIMI
- 型號 171831
- 產(chǎn)地 日本
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2023/10/13 14:32:00
- 訪問次數(shù) 1999
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| 供貨周期 | 一個月 | 貨號 | 171831 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 | 主要用途 | 標準品,糖苷合成，抗體修飾、ADC藥物制作 |
特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶， ENGase 廣泛應用于需要糖肽、糖蛋白和糖復合物的均質(zhì)糖苷的合成應用中。 治療性單克隆抗體的聚糖重構(gòu)尤其重要，因為聚糖結(jié)構(gòu)影響抗體效應器功能、穩(wěn)定性和藥代動力學/藥效學。
為了控制Fc-N-聚糖，我們進行了Fc-N-聚糖從異構(gòu)N-糖基化模式重排為用化學酶法與兩種類型的內(nèi)-β-乙?；铣赏|(zhì)N-聚糖氨基葡糖苷酶(ENG’ases)，一種作為水解酶切割所有異構(gòu)體的酶N-聚糖，另一種用作糖苷合成酶以產(chǎn)生均勻的N-聚糖。
作為起始材料，我們使用了轉(zhuǎn)基因家蠶中產(chǎn)生的抗Her2抗體
繭，由非巖藻糖基少甘露糖型(Man2-3GlcNAc2)、高甘露糖組成
型(Man4-9GlcNAc2)和復合型(Man3GlcNAc3-4)N-聚糖。因此
幾種ENG’ase(endoS、endoM、endoD、endoH和endoLL)的裂解
抗體上的聚糖通過endoS、endoD和endoLL的組合。接下來，所需的N-聚糖(M3；Man3-
GlcNAc1、G0；GlcNAc2Man3GlcNAc1、G2；Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc1，A2；NeuAc2Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc1)
從相應的惡唑啉轉(zhuǎn)移到具有ENG’ase突變體(endo-S-D233Q)的完整抗Her2抗體上的GlcNAc殘基，并且
獲得了糖工程化的抗Her2抗體。抗Her2抗體的結(jié)合測定具有FcγRIIIa-V158的同質(zhì)N-聚糖表明γRIIIa-V158的親和力。此外，糖工程抗Her2的ADCC測定使用SKBR-3和BT474進行抗體(mAb-M3、mAb-G0、mAb-G2和mAb-A2)并揭示了糖型影響ADCC活性。
特異性糖苷水解酶ENDO-CC內(nèi)切酶
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