Nobimpex 無血清T細(xì)胞培養(yǎng)基 003 004

Nobimpex 無血清T細(xì)胞培養(yǎng)基 003  004套裝適用于促進(jìn)和優(yōu)化人來源 T 細(xì)胞的擴(kuò)增。此培養(yǎng)基可支持高密度細(xì)胞的培養(yǎng)。無血清培養(yǎng)相比含血清培養(yǎng)可以減少批次差異，并且可以消除血清帶來的安全隱患。該培養(yǎng)基套裝包含“無血清T細(xì)胞促生長添加劑Nobimpex 004（貨號(hào)N104-0050，50ml）”和“無血清T細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基Nobimpex003（貨號(hào)N103-1000，1000ml）”。其中 “Nobimpex 004”獨(dú)立使用于免疫細(xì)胞治療中T細(xì)胞前5天的擴(kuò)增培養(yǎng)，而“Nobimpex 003”則完成T細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)的后續(xù)幾天的工作。

無動(dòng)物來源成分：

Nobimpex T細(xì)胞培養(yǎng)基套裝均為無血清培養(yǎng)基，不含血清及其他動(dòng)物來源成分，不含抗生素和細(xì)胞因子，人血清白蛋白和人轉(zhuǎn)鐵蛋白是僅有的人來源成分（供體的HIV1&2、HBV和HCV檢測為陰性）。

高質(zhì)量控制：

培養(yǎng)基的配制：

Nobimpex 003需要添加，加入 20ml200mM 的L-溶液或者0.584 g  L-谷粉末（輻射滅菌）每升。建議“Nobimpex 004”按照細(xì)胞培養(yǎng)前5天、分2次進(jìn)行添加（每次25ml）；5天后使用適量的“Nobimpex 003”進(jìn)行培養(yǎng)擴(kuò)增。所有培養(yǎng)基在使用前請按照確定的配方分別添加必須的刺激用抗體和細(xì)胞因子。該培養(yǎng)基是無菌液體（1X），可按需選擇添加抗生素。

使用說明：

1.   取25ml“Nobimpex 004培養(yǎng)基”添加確定量的刺激用抗體和細(xì)胞因子；

2.   按照已確定的方法來準(zhǔn)備新鮮或者凍存的 PBMNCs (外周血單個(gè)核細(xì)胞)；

3.   用計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量；

4.   轉(zhuǎn)移適當(dāng)數(shù)量的細(xì)胞到含有上述培養(yǎng)基（已加入細(xì)胞因子和刺激抗體）的培養(yǎng)瓶中；

5.   把培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中，37 ℃，5% CO2培養(yǎng)；

6.   第3天，添加另外25ml已配制好的“Nobimpex 004培養(yǎng)基” （已加入細(xì)胞因子和刺激抗體）；

7.   第5天及其余時(shí)間，添加適量的已配制好的 “Nobimpex 003培養(yǎng)基” （已加入細(xì)胞因子和刺激抗體）。

產(chǎn)品特性:

Nobimpex 無血清T細(xì)胞培養(yǎng)基套裝(Nobimpex003&004)已經(jīng)經(jīng)過嚴(yán)格的測試，可用于PBMNC中的T細(xì)胞擴(kuò)增。本產(chǎn)品已與其他幾種商業(yè)化可用的無血清培養(yǎng)基做了T細(xì)胞擴(kuò)增比較。實(shí)驗(yàn)中，200，000 PBMNCs/ml 在本產(chǎn)品和另一商業(yè)化培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，培養(yǎng)基含有100 IU/ml IL-2和anti-CD3 (OKT3， 20ng/ml)抗體。

實(shí)驗(yàn)中擴(kuò)增的T細(xì)胞使用51鉻釋放分析來測試細(xì)胞溶解能力。靶細(xì)胞(K562，人慢性白血病細(xì)胞)，使用51鉻標(biāo)記并連接到anti-CD3 (OKT3) Fc受體。當(dāng)與效應(yīng)或者細(xì)胞毒T細(xì)胞混合時(shí)，靶細(xì)胞就會(huì)凋亡或者溶解，并釋放51鉻。上清中51鉻的釋放量與靶細(xì)胞的死亡及功能T細(xì)胞的數(shù)量成正比。