奧林巴斯倒置顯微鏡CKX53在細(xì)胞生長(zhǎng)的應(yīng)用

本文摘自?shī)W林巴斯顯微鏡官——

以下為原文：

自體軟骨細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)特性的高效分析

-匯合檢查軟件在細(xì)胞處理中的應(yīng)用-

奧林巴斯倒置顯微鏡CKX53在細(xì)胞生長(zhǎng)的應(yīng)用

背景

對(duì)自體軟骨細(xì)胞植入和新的再生藥物的開(kāi)發(fā)具有重要意義的兩個(gè)因素是一個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程和有效的細(xì)胞生長(zhǎng)特性分析。這兩個(gè)因素都有相關(guān)的挑戰(zhàn)。實(shí)現(xiàn)一個(gè)穩(wěn)定的培養(yǎng)過(guò)程需要準(zhǔn)確、可重復(fù)的細(xì)胞匯合信息來(lái)預(yù)測(cè)細(xì)胞傳代的最佳時(shí)間。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)特性的分析具有挑戰(zhàn)性，因?yàn)橛脩?hù)希望獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，而不必培養(yǎng)大量的細(xì)胞。奧林巴斯介紹了CKX-CCSW軟件來(lái)改進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，幫助解決這些問(wèn)題。

CKX-CCSW匯合檢測(cè)軟件

結(jié)合顯微鏡和數(shù)碼相機(jī)，該軟件可以測(cè)量活細(xì)胞的匯合度。一個(gè)快速，簡(jiǎn)單的細(xì)胞計(jì)數(shù)程序和高度準(zhǔn)確和可重復(fù)的數(shù)據(jù)，使一致的，可預(yù)測(cè)的細(xì)胞培養(yǎng)在恒定的條件下。此外，可以測(cè)量培養(yǎng)的數(shù)量和密度，而不需要破壞培養(yǎng)，從而盡量減少污染的可能性。重要的細(xì)胞生長(zhǎng)數(shù)據(jù)，如倍增時(shí)間(DT)和群體倍增水平(PDL)，是在不干擾細(xì)胞的情況下高效、無(wú)損地獲得的。

CKX 41顯微鏡、DP 27數(shù)碼相機(jī)和CKX-CCSW軟件.

CKX-CCSW匯合檢測(cè)軟件的效果

1.克服穩(wěn)定自體軟骨細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的挑戰(zhàn)

細(xì)胞通道的時(shí)間通常取決于視覺(jué)評(píng)估，這會(huì)導(dǎo)致人為的錯(cuò)誤和通道時(shí)間的變化。CKX-CCSW軟件提供了準(zhǔn)確的細(xì)胞在培養(yǎng)容器中生長(zhǎng)的匯合信息，用戶(hù)可以在合適的時(shí)間通過(guò)細(xì)胞。

2.克服有效獲取細(xì)胞生長(zhǎng)特性分析數(shù)據(jù)的挑戰(zhàn)

CKX-CCSW匯合檢查軟件提供了準(zhǔn)確、可重復(fù)的細(xì)胞生長(zhǎng)數(shù)據(jù)，因此用戶(hù)可以在培養(yǎng)過(guò)程中計(jì)時(shí)細(xì)胞通道和使用較少的庫(kù)存。

準(zhǔn)確性驗(yàn)證

為了評(píng)價(jià)CKX-CCSW軟件的性能，將軟件計(jì)算的細(xì)胞數(shù)與熒光染色圖像計(jì)算的細(xì)胞數(shù)進(jìn)行比較。聚焦顯微鏡是獲得精確生長(zhǎng)曲線的一個(gè)重要因素，該軟件的聚焦指示器產(chǎn)生了準(zhǔn)確的結(jié)果。該軟件的準(zhǔn)確度為84-111%，證明該軟件能建立可靠的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。

利用CKX-CCSW技術(shù)，可以在低密度、高密度細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)下，繪制出與熒光觀察結(jié)果相當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)曲線，而不受染色細(xì)胞的影響。

結(jié)語(yǔ)

將CKX 41顯微鏡、DP 27數(shù)碼顯微鏡攝像機(jī)和CKX-CCSW匯合檢測(cè)軟件結(jié)合在一起，使用戶(hù)能夠準(zhǔn)確地估計(jì)出細(xì)胞通過(guò)的適當(dāng)時(shí)間，同時(shí)將人為誤差降低。該軟件在不改變細(xì)胞培養(yǎng)室工作流程的情況下，可以方便地獲得準(zhǔn)確、可重復(fù)的細(xì)胞生長(zhǎng)數(shù)據(jù)。

這項(xiàng)研究部分由日本醫(yī)學(xué)研究開(kāi)發(fā)廳(AMED)和經(jīng)濟(jì)、貿(mào)易和工業(yè)部在其題為“開(kāi)發(fā)再生醫(yī)學(xué)產(chǎn)業(yè)化基礎(chǔ)評(píng)估技術(shù)”的方案中批準(zhǔn)。樣品準(zhǔn)備和圖像數(shù)據(jù)由奧林巴斯-RMS公司提供。