XSL0015 透射電鏡

透射電鏡 Transmission Electron Microscope, 簡稱TEM，透射電鏡可以觀察樣品的內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)即亞顯微結(jié)構(gòu)或者超微結(jié)構(gòu)。透射電鏡使用的是透射電子，并收集透過樣品的電子，從而提供了樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)的信息，如晶體結(jié)構(gòu)、形態(tài)以及應(yīng)力 狀態(tài)的信息。目前先.進(jìn)的TEM其空間分辨率達(dá)到了pm級別。由于透射電子的要求，TEM的樣品必須制備成超薄切片，通常為50-100 nm，樣品制備比較繁瑣，常用的方法有超薄切片法、冷凍超薄切片法、冷凍蝕刻法、冷凍斷裂法等。

實(shí)驗(yàn)意義

1. 透射電鏡是表征各種樣品的有力工具，它的多功能性和高的空間分辨率使其在許多應(yīng)用中非常有價值。

2. TEM能夠觀察樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，同時在病理診斷中可以補(bǔ)充和糾正光鏡診斷的疑難問題，可以提高病理診斷的準(zhǔn)確性。

實(shí)驗(yàn)步驟

透射電鏡生物樣品的制備：

①取小于1立方毫米的組織；

②用2.5%戊.二.醛（磷酸緩沖液配制）固定2小時，0.1M的磷酸緩沖液漂洗3次×15 min；

③1%鋨酸固定液固定2小時，0.1M的磷酸緩沖液漂洗3次×15 min；

④梯度乙醇進(jìn)行脫水，4℃進(jìn)行；

⑤包埋：使用純.丙.酮+包埋液（2:1）室溫處理4小時，純.丙.酮+包埋液（1:2）室溫過夜，純包埋液37℃處理3小時；

⑥固化：37度烘箱過夜，45度烘箱12小時，60度烘箱24小時；

⑦超薄切片機(jī)切片，厚度在50 nm左右；

⑧3%醋酸鈾-枸櫞酸鉛雙染色；

⑨透射電鏡觀察，拍片。

結(jié)果展示

實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1. 實(shí)驗(yàn)周期：一個月左右

2. 交付標(biāo)準(zhǔn)：電鏡圖片、病理報(bào)告、實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等）

實(shí)驗(yàn)需與客戶確認(rèn)的信息

1. 樣本的種屬

2. 樣本類型，是組織還是細(xì)胞

3. 樣本數(shù)量

4. 透射電鏡分析要求、拍照要求或是參考文獻(xiàn)

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