XSL0126 Mouse皮下移植瘤

Mouse皮下移植瘤

1.腫瘤的來源：

人的胸腹水，手術(shù)切除的腫瘤，小鼠自發(fā)或誘發(fā)的腫瘤，或者已經(jīng)建系的腫瘤細(xì)胞株。

2.移植瘤的建立一般是選擇自發(fā)瘤或誘發(fā)瘤組織塊，或人的原代腫瘤細(xì)胞為佳。

已建立的腫瘤細(xì)胞株經(jīng)過多次傳代后，其生物學(xué)特性已發(fā)生一定程度的改變，如形態(tài)學(xué)上的改變、惡性程度以及轉(zhuǎn)移特 性的變化等。

3.移植瘤的接種方法

1）腹水瘤移植接種法

2）實(shí)體瘤移植接種法

（1）小塊接種法

（2）腫瘤組織漿接種法：

（3）培養(yǎng)細(xì)胞接種

4.腹水型腫瘤模型的制作 常規(guī)復(fù)蘇腫瘤細(xì)胞并培養(yǎng)，取指數(shù)生長期腫瘤細(xì)胞，離心收集，顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107／ml，取健 康小鼠，無菌條件下每只小鼠腹腔接種細(xì)胞懸液0.2-0.5 ml，約8-10 d成腹水瘤。

5.皮下腫瘤模型的制作

1）.細(xì)胞接種法：

取腹腔接種腫瘤細(xì)胞7-l0d 、腹水生長良好的小鼠脫頸處死，無菌抽取腹水以生理鹽水稀釋調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107／ ml（一般以生理鹽水l:2-l:3倍稀釋），每只0.2 ml接種到小鼠腋窩皮下，建立小鼠皮下移植瘤模型。抽出的腹水應(yīng)為白色之 濃稠液體為佳。.直接將體外培養(yǎng)的指數(shù)生長期腫瘤細(xì)胞，離心收集，顯微鏡下常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107／ml， 取健康小鼠，無菌條件下每只小鼠皮下接種細(xì)胞懸液0.2 ml。

2）.組織塊接種法：

先用細(xì)胞接種法建立皮下腫瘤模型。 選擇接種后7-l0d，腫瘤生長旺盛且無潰破的動(dòng)物，脫頸處死后消毒操作部位皮 膚然后切開，選擇生長良好的瘤組織置于無菌平皿內(nèi)(平皿內(nèi)放置少許生理鹽水或細(xì)胞培養(yǎng)液)。將腫瘤組織jian成2-3mm的小 塊，向無菌套管內(nèi)塞人一小塊，接種于健康動(dòng)物前腋窩皮下，整個(gè)接種時(shí)間應(yīng)盡早可能短，一般不應(yīng)超過30min。如接種動(dòng) 物數(shù)較多，可制成細(xì)胞懸液進(jìn)行接種，以上法切取生長良好的癌組織，剪成小塊，用無菌玻璃研磨，磨勻后裝人無菌容器 內(nèi)，加生理鹽水稀釋l:3-l:4的瘤細(xì)胞，每個(gè)動(dòng)物接種0.2ml。

6.移植性腫瘤模型的優(yōu)點(diǎn):

1).可以使一群動(dòng)物同時(shí)帶有相同的腫瘤。

2).腫瘤生長速率比較一致，個(gè)體差異較小。

3）.接種的成活率高，接近100 ％ ，對宿主的影響也類似，易于客觀的判斷療效。

4）. 腫瘤形態(tài)、生長率、對藥物的敏感性、動(dòng)物的死亡時(shí)間等非常相近。

7.皮下移植性腫瘤的缺點(diǎn)：

1）.皮下移植腫瘤生長速度快，增殖比率高，體積倍增時(shí)間短，是與人體腫瘤的顯著不同

2）. 生物學(xué)行為往往僅有腫瘤的局限性生長和浸潤，難以觀察到重要的淋巴和血道轉(zhuǎn)移行為，與自然狀態(tài)腫瘤相關(guān)性不 高，不能很好地模擬腫瘤在人體內(nèi)的自然生長過程，對于研究其病理生理過程存在較大的局限性，僅適合用作評價(jià)藥物療效 的初步篩選模型。

8.原位移植腫瘤模型： 指將腫瘤細(xì)胞或腫瘤組織塊原位移植到免疫缺陷動(dòng)物的組織器官內(nèi)，使之產(chǎn)生腫瘤并形成自發(fā)性轉(zhuǎn)移灶。此種模型是目 前較為理想的動(dòng)物模型，為腫瘤的生長提供了適宜的環(huán)境，能較好的模擬人體內(nèi)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移的全過程。

9.原位移植腫瘤模型的制作：

1）.腫瘤的來源：人的胸腹水，手術(shù)切除的腫瘤，小鼠自發(fā)或誘發(fā)的腫瘤，或者已經(jīng)建系的腫瘤細(xì)胞株。 2）.方法：將稀釋好的腫瘤細(xì)胞50-100ul約2×108/ml直接接種到器官的漿膜下?；蛘呦葘⒛[瘤細(xì)胞皮下接種，達(dá)1 cm 左 右，瘤組織取出切成1-3mm 的小塊。將準(zhǔn)備好的癌組織塊植入器官的漿膜下，縫合漿膜。

10.同位移植瘤動(dòng)物模型的優(yōu)點(diǎn)：

可以模擬出同原發(fā)腫瘤發(fā)病部位相似的腫瘤微環(huán)境，同時(shí)也能夠在相應(yīng)的部位形成轉(zhuǎn)移灶，可以避免由于移植位點(diǎn)特異 性所引起的假陽性結(jié)果．并且可以對臨床上的一些情況進(jìn)行模擬，如應(yīng)用在轉(zhuǎn)移癌的研究來模擬那些臨床上已經(jīng)切除了原發(fā) 腫瘤而又發(fā)生了轉(zhuǎn)移的患者。同位裸鼠移植瘤動(dòng)物模型成為我們研究治療方案，闡明與浸潤、轉(zhuǎn)移和腫瘤治liao相關(guān)的分子生 物學(xué)機(jī)制提供了重要而有效的手段。

11.原位移植瘤模型的應(yīng)用：

1）為彌補(bǔ)異位移植方法的不足，避免假陽性結(jié)果的產(chǎn)生。對于所有實(shí)驗(yàn)性治療方法來講，最終都要應(yīng)用原位移植瘤動(dòng) 物模型來更深一步研究其抗腫瘤譜及其分子生物學(xué)機(jī)制。

2）對于細(xì)胞毒類藥物，那些對腫瘤微環(huán)境起調(diào)控作用的抗腫瘤藥物只可以在原位移植瘤動(dòng)物模型上進(jìn)行研究。如可以 調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)物的化liao藥物和可以調(diào)控機(jī)體局部組織反應(yīng)的藥物。

3）如果想觀察藥物對轉(zhuǎn)移性腫瘤的作用，應(yīng)用原位裸鼠移植瘤動(dòng)物模型進(jìn)行研究。

需確認(rèn)的信息

1. 模型種屬（大鼠還是小鼠或是其他種屬）

2. 動(dòng)物體重有無要求，年齡有無要求

3. 雌雄有無要求

4. 模型構(gòu)建具體方案

5. 取材要求（采血、取組織樣本）

 Mouse皮下移植瘤

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