XSL0161 白血病動物模型

白血病動物模型

白血?。?/span>Leukemia）是一種常見的惡性血液疾病，俗稱血癌。據(jù)統(tǒng)計，白血病是兒童惡性腫瘤的頭號原 因，在兒童及35歲以下成人中發(fā)病率位居第yi。同時也是shi大惡性腫瘤之一。目前，白血病具體的發(fā)病 原因至今尚未研究透徹，因此建立合適的白血病動物模型，對于白血病發(fā)病機制及藥物研發(fā)具有重要意義。

白血病是常見液體瘤

白血病是常見的液體瘤，與結(jié)腸癌、肝癌等實體瘤不同的是，它是造血干細(xì)胞的異常分化和過度增殖導(dǎo)致，因此腫瘤細(xì)胞會遍布全身，會侵犯身體的每個臟器，造成全身衰竭。

造血干細(xì)胞是血液系統(tǒng)中的成體干細(xì)胞，具有長期自我更新和分化成各類成熟血細(xì)胞的能力。如下圖為造血干細(xì)胞可分類形成各種血細(xì)胞，如紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞：

白血病致病因素

現(xiàn)階段認(rèn)為白血病的發(fā)病因素：化學(xué)因素、電離輻射、藥物、毒物、病毒、遺傳因素等有關(guān)。

白血病主要分為四類

根據(jù)白血病細(xì)胞的成熟程度和自然病程，白血病可分為急性和慢性兩大類，臨床上，白血病共分為四大類：急性髓系白血病（AML）、急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）、慢性髓系白血?。–ML）和慢性淋巴細(xì)胞 白血病（CLL）。兒童白血病90%以上是急性的，其中急性白血病中70%～80%是ALL。

常用的白血病細(xì)胞株

白血病中常用的小鼠品系

用于建立白血病小鼠模型的小鼠可分為近交系和突變系。根據(jù)不同類型和目的選擇不同的小鼠品系，具體如下圖所示：

常用的白血病動物模型，主要分為三類：

 一、異種移植模型 異種移植模型是常用的淋巴瘤動物模型。根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇相應(yīng)的小鼠品系和細(xì)胞株后，通常細(xì)胞的接 種方式為皮下注射、腹腔注射和尾靜脈注射。 皮下注射和腹腔注射操作簡單，很快在接種部位形成腫瘤或腹腔內(nèi)形成多發(fā)性腫瘤，適合篩選針對白血病的藥物。但該類模型與白血病臨床病人實際情況差距較大。

異種移植示意圖

尾靜脈注射接種模型，可形成全身性擴散的白血病模型。符合白血病臨床過程規(guī)律，此模型以動物生存期作為評價藥效的主要指標(biāo)，并對采血樣本進(jìn)行血細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測。

下面以尾靜脈注射模型實驗步驟為例：

根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇實驗小鼠和細(xì)胞（如NOD-SCID小鼠和人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株）；荷瘤細(xì)胞量 一般1-2 × 105 /只。

破壞動物殘留的免疫能力：給予小鼠射線照射（如1.5Gy劑量60Coγ射線全身照射）； 細(xì)胞接種：小鼠射線照射4-5天后，收集對數(shù)期生長的細(xì)胞，尾靜脈注射細(xì)胞懸液； 移植后第二天對小鼠分組，進(jìn)行給藥；統(tǒng)計小鼠生存率。

評價：此種模型易建立，成瘤率高，成瘤時間差異小，是篩選抗腫瘤藥物常用的動物模型。

數(shù)據(jù)分析：

小鼠經(jīng)X射線照射后尾靜脈注射2×105個hMRP8-PML-RARα細(xì)胞，建立ATRA耐藥移植型小鼠模型。如下圖：

圖A統(tǒng)計生存曲線，給藥組（LG362B和陽性藥ATRA）均可延長小鼠生存期。

圖C與D剝離小鼠脾臟拍照并稱重，患白血病小鼠較正常小鼠脾臟腫大，給藥組（LG362B和陽性藥 ATRA）均可使脾臟恢復(fù)正常。

圖E：取小鼠外周血和骨髓細(xì)胞制作涂片進(jìn)行Wright-Giemsa染色，從形態(tài)學(xué)上可觀察到給藥組（LG362B 和陽性藥ATRA）可誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化。

二、基因修飾型白血病模型 基因修飾型白血病模型主要為利用基因編輯技術(shù)進(jìn)行敲除或插入特定基因，從而誘發(fā)動物產(chǎn)生白血病。如 骨髓增生異常綜合征（MDS）轉(zhuǎn)化為急性髓系白血病是由于NRAS和BCL-2在形成復(fù)合物，建立骨髓增生 異常綜合征轉(zhuǎn)化AML小鼠模型MRP8[NRASD12/hBCL-2]篩選出BCL-2抑制劑ABT-737[4]。下圖為主要的 基因工程型白血病模型：

評價：基因修飾型動物模型成瘤機制清楚、病理表現(xiàn)明確，常用于白血病發(fā)病機制的研究。但需構(gòu)建基因 工程載體，胚胎培養(yǎng)、顯微注射等一系列工作，周期長，花費大，一般根據(jù)實驗需求構(gòu)建適合的動物模型。

三、誘發(fā)型白血病模型

誘發(fā)白血病示意圖

評價：誘發(fā)型模型操作簡便，基本模擬了腫瘤的發(fā)生過程，是一種較好的建立腫瘤模型的方法。但生物學(xué) 特征不穩(wěn)定，并且誘導(dǎo)劑對人也有一定的危害，導(dǎo)致該模型較少使用。

服務(wù)內(nèi)容： 裸鼠的購買，飼養(yǎng)，造模、取材，和后續(xù)指標(biāo)的檢測等。

腫瘤模型（皮下移植瘤、原位癌）：

乳腺癌 肺癌 結(jié)腸癌 胃癌 肝癌 白血病 淋巴瘤

皮膚癌 前列腺癌 食管癌 宮頸癌 卵巢癌 人絨毛膜癌

口腔癌 腎癌 膀胱癌 胰腺癌 大腸癌

交付標(biāo)準(zhǔn)： 整套的動物模型構(gòu)建，動物飼養(yǎng)，標(biāo)本采集和指標(biāo)檢測的實驗服務(wù)，提供詳細(xì)的動物實驗報告單。

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