BH3457 人雪旺細胞永生化

細胞說明：國內(nèi)原代細胞永生化建系，S100或GFAP免疫熒光染色為陽性。
細胞背景：雪旺細胞沿神經(jīng)元的突起分布，包裹在神經(jīng)纖維上，雪旺細胞的外表面有基膜，能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子，促進受損的神經(jīng)元的存活及其軸突的再生，參與周圍神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構(gòu)成。研究表明，神經(jīng)元延伸時對與其接觸的底物是非常具有選擇性的，而且一旦與雪旺細胞接觸，神經(jīng)纖維的延伸就會嚴格限制在Bungner帶內(nèi)。

該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因

細胞特性：

1）來源：正常坐骨神經(jīng)組織

2）形態(tài)：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)

3） 含量：>1x106  細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用

培養(yǎng)條件：

1） 準備原代雪旺細胞專用培養(yǎng)基；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，100%；

注意事項：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）ydbm-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

4）運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代