BH3452 moc2小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌

    moc1/moc2 小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌 /雌性
品系： C57BL/6 Cxcr3-/
細(xì)胞來源：國(guó)外
細(xì)胞背景：口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）是頭頸癌的一個(gè)突出子集，頭頸癌是第六大常見癌癥。發(fā)生 OSCC 的主要危險(xiǎn)因素是致癌物暴露，將頭頸癌的這一亞群與人瘤病毒誘導(dǎo)的頭頸癌區(qū)分開來。盡管在 檢測(cè)、手術(shù)、hl和放療方面取得了進(jìn)展，但 OSCC 的預(yù)后幾十年來一直保持穩(wěn)定。此外，在 診斷時(shí)，大約三分之二的 OSCC 患者患有局部晚期疾病，導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率增加。

D=4418

細(xì)胞特性：形態(tài)：淋巴母多角形細(xì)胞樣,貼壁+懸浮生長(zhǎng)。用途：僅供科研使用

培養(yǎng)條件 ：
1）500ML 培養(yǎng)基：IMDM:F10/F12=2:1（313ml:157ml）培養(yǎng)基+FBS 10%（50ml）+2.5mg/500ml 胰島素+20ug/500ml +2.5ug/500ml EGF+ P/S 1% 雙抗1%

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%
注意事項(xiàng)：MOC1 細(xì)胞活性特別高，增值速度非?？?，不建議傳代密度太大，而選擇稀一點(diǎn)重鋪，等長(zhǎng)滿 80%左右傳代的時(shí)候，很難消化下來，建議加入 0.25%EDTA 的ym進(jìn)去后充分混勻所有細(xì)胞都接觸到y(tǒng)m，放置到培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，時(shí)長(zhǎng)大約是 3-4 分鐘左右后拿出來，在培養(yǎng)器皿的側(cè)邊進(jìn)行拍打幫助細(xì)胞脫落，拍打過程大約持續(xù) 2 分鐘左右才會(huì)脫大部分細(xì)胞，如果脫落比例還不是很多，也可以重新放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化 1-2 分鐘后再次拿出來進(jìn)行拍打脫落，等 80-90%細(xì)胞都脫落后再終止消化，離心重懸再重新鋪瓶，分散均勻。

MOC2 細(xì)胞貼壁性和常規(guī)細(xì)胞類似沒有特別牢固。倍增周期也沒有 MOC1 快。采用常規(guī)消化方法處理。

貼壁細(xì)胞參考：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加入 0.25％（w / v）ydbm-0.53 mM EDTA 于培養(yǎng)瓶中（T25 瓶 1-2mL，T75 瓶 2-3mL），置 于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察 細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入 3-4ml 含10%FBS 的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶/6cm 培養(yǎng)皿中，添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按 1:2~1:5 的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前 3 代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

4）運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
懸浮細(xì)胞參考：

懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)胞，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，一般情況下細(xì)胞密度維持在 1×105~1×106 個(gè)/mL（不同細(xì)胞對(duì)密度要求不同，）可以維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中 1000rpm，離心 5min，棄去上清，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶中，添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按 1:2~1:4 的比例進(jìn)行