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CC96181 Tuner(DE3) pLysS感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96181
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2024/11/1 10:51:48
- 訪問次數(shù) 7
產(chǎn)品標(biāo)簽
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產(chǎn)品簡介
Tuner(DE3)菌株是 BL21 菌株的 lacZY 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突變株，此突變導(dǎo)致 IPTG 以均一
速度進(jìn)入體系中大腸桿菌的每個細(xì)胞，產(chǎn)生更加嚴(yán)格、均一的濃度依賴。將具有氯m素抗性的
pLysS 質(zhì)粒導(dǎo)入 Tuner(DE3)細(xì)胞中即是 Tuner(DE3) pLysS，其中 pLysS 表達(dá) T7 溶菌m，可與 T7
RNA 聚合酶結(jié)合抑制其轉(zhuǎn)錄活性，進(jìn)而降低目標(biāo)蛋白的本底表達(dá)水平，但不干擾 IPTG 誘導(dǎo)的表達(dá)，
因而非常適合毒性蛋白的原核表達(dá)。該菌株染色體整合了λ噬菌體 DE3 區(qū) (DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體
RNA 聚合酶)，可同時表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶，可用于 pET 系列，pGEX，
pMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Tuner(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效
率達(dá) 107 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Tuner(DE3)pLysS
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB- ) gal dcm lacY1 λ(DE3) pLysS CamR
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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