CC96176 GT115 感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海語(yǔ)純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96176
- 產(chǎn)地
- 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2024/11/4 16:40:20
- 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 17
產(chǎn)品標(biāo)簽
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
GT115 菌株,是專(zhuān)門(mén)用來(lái)克隆含有發(fā)夾結(jié)構(gòu)(Hairpin)或重復(fù)序列等 DNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)的基因序列的
大腸桿菌菌株。大腸桿菌中存在一種 SbcCD 蛋白復(fù)合體,可以識(shí)別 DNA 發(fā)夾結(jié)構(gòu),并將其切除;
將 sbcC 和 sbcD 兩個(gè)基因突變,便增強(qiáng)了發(fā)夾結(jié)構(gòu) DNA 的穩(wěn)定性。同時(shí)在大腸桿菌基因組中引入
uidA(?MluI)::pir-116,使 GT115 可以表達(dá) π 蛋白,從而讓含有 R6Kg ori 復(fù)制子的質(zhì)粒(如 pCpG
mcs、pCpG-LacZ、pCpG-siRNA等)可以在該菌株中正常復(fù)制。該菌株還含有具有核酸酶 (endA)突
變、重組酶 (recA)突變,因此可以增強(qiáng)外源 DNA 的穩(wěn)定性。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè),GT115 感受
態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
GT115
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ?M15?lacX74 recA1 rpsL (StrR ) endA1 ?dcm uidA (?MluI)::pir-116
?sbcC-sbcD
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。
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