CC96177 EPI400 感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海語(yǔ)純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96177
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2024/11/4 16:45:05
- 訪問(wèn)次數(shù) 19
產(chǎn)品標(biāo)簽
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
EPI400 來(lái)源于 EC100 菌株,將 EC100 核基因中控制質(zhì)粒拷貝數(shù)的 pcnB 基因改造成誘導(dǎo)型啟動(dòng)子驅(qū)
動(dòng)后獲得了 EPI400 菌株。EPI400 菌株可以顯著降低大部分質(zhì)粒的拷貝數(shù),特別適合于各種含不穩(wěn)
定 DNA 的質(zhì)粒或含有毒性基因的克??;在加入 CopyMore 400 誘導(dǎo)劑后可將質(zhì)粒的拷貝數(shù)提高至正
常狀態(tài)。mcrA 突變和 mrr-hsdRMS-mcrBC 缺失的基因型使得 EPI400 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧
啶或甲基腺嘌呤的 DNA 。recA1和 endA1突變有利于插入 DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA的提取。
lacZΔM15 標(biāo)記的存在使 EPI400 可用于藍(lán)白斑篩選,tonA 突變賦予其抗噬菌體 T1 和 T5 的能力,
rpsL 突變賦予其鏈m素抗性。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè),EPI400 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107
cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
EPI 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL
(StrR) nupG trfA tonA pcnB dhfr
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔
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