P4927 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒

諾博萊德 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒

NobleRyder P4927 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品貨號：P4927

產(chǎn)品名稱：石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒

規(guī)格：50T ; 100T

儲存條件：RT，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P4927 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒

適用樣本：動物組織

產(chǎn)品介紹

石蠟包埋組織是重要的臨床材料，研究其中正常細(xì)胞和疾病相關(guān)的細(xì)胞，特別是癌細(xì)胞中 標(biāo)記蛋白的差異表達(dá)水平，對于癌化的進(jìn)展、癌癥類型的判定，以方便于診斷和治療具有重 要的意義。

石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒適用于從各種石蠟包埋的組織樣本中提 取總蛋白，提取過程簡單方便，提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳等下游蛋白 研究。

可以提供針對動物細(xì)胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、液體、 土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。可以提供針對不同下游實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的試劑盒，例如用 于 Western Blotting 和雙向電泳等不同下游應(yīng)用的試劑盒；含去垢劑成分和不含去污劑成分 的蛋白提取試劑盒；專用于蛋白質(zhì)譜檢測、Pull-down 實(shí)驗(yàn)的試劑盒等總計(jì) 300 多種蛋白提 取試劑盒可供選擇。

注：

1. 有效期為試劑盒未拆封前按要求條件保存的有效期。

2. 試劑拆封后請盡快使用完！

產(chǎn)品簡介：

石蠟包埋組織是重要的臨床材料，研究其中正常細(xì)胞和疾病相關(guān)的細(xì)胞，特別是癌細(xì)胞中標(biāo)記蛋白的差異表達(dá)水平，對于癌化的進(jìn)展、癌癥類型的判定，以方便于診斷和治療具有重要的意義。

石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒適用于從各種石蠟包埋的組織樣本中提取總蛋白，提取過程簡單方便，提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳等下游蛋白研究。

自備試劑和儀器

離心機(jī)、振蕩器、勻漿機(jī)/勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套

使用方法：

一、使用注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開

蓋時(shí)試劑損失。

3. 注意低豐度蛋白的檢測方法。

4. 離心機(jī)轉(zhuǎn)速有相對離心力（RCF，×g）和每分鐘轉(zhuǎn)速（RPM，r/min）兩種表示方式，有些離心

機(jī)設(shè)置有RPM和×g顯示切換，但部分離心機(jī)沒有自動切換功能。需要用下面的公式進(jìn)行換算：g=r×1.118×10^-5×rpm²（r為有效離心半徑，即從離心機(jī)軸心到離心收集管底部中心位置的長度，單位為厘米)例如:轉(zhuǎn)速為3000rpm，有效離心半徑為10cm，則相對離心力（RCF，×g）為=10×1.118×10^-5×3000²=1006.2（×g）。

5. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

6. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

二、操作步驟

1.提取液制備：

每500μl蛋白提取液A中加入5μl蛋白提取液B，混勻后備用。

2.樣本常規(guī)脫蠟，然后用流水沖洗30分鐘。

3.將樣本用手術(shù)jian刀盡可能剪碎，每100mg樣本中加入300-500μl蛋白提取液，渦旋振蕩10秒。

4.在37℃條件振蕩1小時(shí)。

5.在恒溫器（Heat Block）或水浴鍋中100℃保溫10分鐘。

6.渦旋振蕩10秒混勻。

7.在恒溫器（Heat Block）或水浴鍋中60℃保溫1小時(shí)。

8.渦旋振蕩10秒混勻。

9.在12000×g條件下離心15分鐘。

10.將上清吸入另一干凈離心管，即可得到總蛋白。

11.將上述蛋白提取物定量后分裝保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

注：

①提蛋白濃度低？

固定組織的蛋白質(zhì)回收率在 30%左右。

需要加大組織上樣量，調(diào)整提取液用量來調(diào)整蛋白濃度。

②WB 做不出來？

固定組織的蛋白質(zhì)回收率較低，一般在 30%左右。低豐度蛋白通常較難檢出。

甲醛固定的蛋白質(zhì)末端基團(tuán)與甲醛之間形成交聯(lián)鏈，各種氨基，亞氨基及酰氨基，肽，胍基，羥基，SH 和芳香環(huán)等都會參與甲醛固定蛋白質(zhì)的基團(tuán)反應(yīng)，在這個(gè)過程中，絕大部分常規(guī)的暴露抗原決定基團(tuán)遭到破壞，通常從甲醛固定石蠟包埋的樣本回收的蛋白質(zhì)做 WB 成功的概率較低，最好選用抗體說明書上同時(shí)可以做 WB 和 IHC 應(yīng)用的抗體。

注意事項(xiàng)：

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹di清除殘留清潔劑。

3. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品訂購信息：

P4927  石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒  50T/100T