Pi-102 多功能熒光儀

Pi-102 多功能熒光儀

原理

ATP是三磷酸腺酐的簡(jiǎn)稱，是細(xì)胞內(nèi)供能分子。Pi-102 食品細(xì)菌快速測(cè)定儀通過(guò)檢測(cè)樣品中ATP與熒光素酶的發(fā)光反應(yīng)，得出光單位讀數(shù)，經(jīng)換算可估算出樣品中ATP總數(shù)水平，進(jìn)一步間接判斷樣品中微生物總數(shù)，為食品衛(wèi)生監(jiān)督現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)提供參考。

首先使用相關(guān)試劑對(duì)細(xì)菌外ATP進(jìn)行降解、消除。再使用提取液釋放細(xì)菌內(nèi)的ATP并通過(guò)酶阻止ATP的降解，zui后加入熒光素酶與ATP進(jìn)行發(fā)光反應(yīng)。

通過(guò)高靈敏度光電倍增管所測(cè)量的發(fā)光值與實(shí)際存在的ATP成正比。再通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)，就可能計(jì)算出被測(cè)樣品的ATP含量并以fg或RLU形式表示。

應(yīng)用范圍

食品工業(yè)、化妝品制造業(yè)、醫(yī)療單位衛(wèi)生監(jiān)測(cè)。

配合試劑，可對(duì)測(cè)液體、固體食品、表面等微生物總數(shù)做快速評(píng)估。注意，結(jié)果為參考用。

配置情況

熒光檢測(cè)儀 主機(jī)                 1 臺(tái)

檢測(cè)試劑 （選配）

Biothem 266-112 試劑盒（食品細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)試劑盒）

技術(shù)參數(shù)

檢測(cè)精度    1 X 10^-18 mol/ATP/assay

檢測(cè)時(shí)間    默認(rèn)5秒 （0.2-100秒可調(diào)）

檢測(cè)模式    RLU 、 fg （細(xì)菌細(xì)胞ATP含量）

資料儲(chǔ)存    結(jié)果可分類儲(chǔ)存，800個(gè)記憶存儲(chǔ)

屏幕顯示    LCD

尺寸/重量    208 *105 * 93 （長(zhǎng)*寬*高mm） / 1.5 kg

測(cè)量值      0 – 99,999 RLU

精確誤差    + / - 5 %

與PC連接   可實(shí)時(shí)檢測(cè)并傳輸結(jié)果

電力         內(nèi)置 Ni/Cd 充電電池，外接電源

Pi-102 食品細(xì)菌快速測(cè)定儀 與SystemSUREⅡ ATP 熒光儀對(duì)比

相關(guān)證書(shū)

美國(guó)MPC（Medical Packaging Corporation）總公司 ——Hygiena母公司出具：

美國(guó)公共健康與社會(huì)福利部（衛(wèi)生與公眾服務(wù)部）

食品及藥物管理局 許可證 No :2023790

美國(guó)加利福尼亞州 公眾衛(wèi)生部

食品及藥物管理局 生產(chǎn)許可證No :61193

注：本產(chǎn)品不屬于醫(yī)療器械

Pi-102熒光儀使用手冊(cè)

版本：1.0

目錄

1． 儀器

1．1          儀器簡(jiǎn)介

1．2          應(yīng)用試管尺寸

1．3          按鍵操作說(shuō)明

1．4          電源管理

1．5          安裝snapshot的檢測(cè)倉(cāng)

2． 測(cè)量

2．1   快速啟動(dòng)

2．2   測(cè)量選項(xiàng)

2．2．1 目錄

2．2．2 選項(xiàng)

3． 維護(hù)和故障排除

3．1 維護(hù)

3．2 故障排除

質(zhì)保承諾： 承諾聲明

Hygiena保證在Pi-102售出之后的12個(gè)月內(nèi)對(duì)其性能和功能負(fù)責(zé)。由適當(dāng)?shù)牟僮魉斐傻膶?duì)Pi-102的損壞以及使用未經(jīng)*的零配件均不在此保證范圍內(nèi)。

警告：

請(qǐng)?jiān)谑褂肞i-102熒光儀之前仔細(xì)閱讀此使用手冊(cè)。

清潔前請(qǐng)務(wù)必?cái)嚅_(kāi)電源。只可使用濕抹布清潔儀器表面，任何清潔劑都可能有損儀器表面。

只可使用Pi-102的電源插頭，其它的電源設(shè)備可能損壞Pi-102。

只有經(jīng)過(guò)*和培訓(xùn)的人員才能從事Pi-102的維修和維護(hù)。

此手冊(cè)敘述詳盡，Hygiena不對(duì)由于使用不當(dāng)造成的損壞負(fù)責(zé)。

與本文件相關(guān)的所有權(quán)利歸Hygiena所有，未經(jīng)Hygiena書(shū)面*，不得擅自轉(zhuǎn)載本文件任何內(nèi)容。

Hygiena International Ltd.和Hygiena LLC是美國(guó) Medical Packaging Corporation Inc.,子公司。

1．儀器

1．1 儀器簡(jiǎn)介

Pi-102熒光儀是一臺(tái)測(cè)量生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光的高靈敏度儀器。它可以獨(dú)立使用，也可以與PC機(jī)和配套軟件相連。

1．2 應(yīng)用試管規(guī)格

標(biāo)準(zhǔn)的Hygiena試管的尺寸是12×55mm，但直徑在11－12mm，高在47－82mm范圍之內(nèi)的試管都可在Pi-102機(jī)器上使用。

Pi-102還提供了一個(gè)Hygiena snapshot檢測(cè)拭子（用于衛(wèi)生監(jiān)控）使用的附加倉(cāng)。在這種情況下無(wú)需使用試管。

1．3 鍵盤(pán)和顯示器

ON/OFF：開(kāi)關(guān)鍵

??：回到上級(jí)菜單，或跳出鍵

?和?：瀏覽菜單

         ：從菜單眾選擇程序，或進(jìn)入鍵

O O O ：顯示結(jié)果

關(guān)于Pi-102

Supply：連接電源

Charge（Std.）：使用電源操作Pi-102

Charge（Fast）：快速充電設(shè)備

1．4 電源

用戶可選擇使用電源或使用充電電池。當(dāng)使用電源的同時(shí)，Pi-102對(duì)電池進(jìn)行充電。Pi-102一側(cè)的“Charge”選擇鍵應(yīng)置于“Std.”位置。若使用快充，插入電源后將“Charge”選擇鍵至于“Fast”。電池型號(hào)是Ni/Cd，為避免“記憶受損”，等“empty”指示等亮再充電。

1．5 安裝snapshot檢測(cè)的附加倉(cāng)

建議在開(kāi)啟Pi-102之前進(jìn)行安裝。只要小心移除Pi-102上的倉(cāng)蓋，安放上附加部分再將倉(cāng)蓋安裝在附加部分頂部，附加倉(cāng)就被輕松安裝好了。安裝時(shí)注意各部件連接正確并安裝在正確的位置。這樣，Pi-102就可檢測(cè)snapshot裝置了。去除附加倉(cāng)只需除掉倉(cāng)蓋和附加倉(cāng)，再把倉(cāng)蓋蓋回倉(cāng)口即可。

2．     測(cè)量

2．1 快速啟動(dòng)

? 推ON/OFF鍵

? 按    （目錄）

? 按    （OK），或按?在目錄中選擇02…08再按

? 按    （新），目錄中的舊結(jié)果被清除

? 按     開(kāi)始測(cè)量

? 下一標(biāo)本，按     兩次

? 結(jié)果被保存，按?可瀏覽目錄中以前保存的結(jié)果

? 按??兩側(cè)，推出測(cè)量

? 按ON/OFF鍵兩次，關(guān)閉Pi-102。

注意：測(cè)量過(guò)程中請(qǐng)保持測(cè)量倉(cāng)處于關(guān)閉狀態(tài)，測(cè)量完畢后再取出標(biāo)本。

2．2 測(cè)量選項(xiàng)

開(kāi)機(jī)后，屏幕顯示兩行字：LIST（目錄）和OPTIONS（選項(xiàng)）。

2．2．1 目錄：

您可選擇8個(gè)不同的目錄，每個(gè)可執(zhí)行100個(gè)檢測(cè)。

選擇目錄請(qǐng)按    ，屏幕將顯示：

List 01

Name ……

100 pos     , 00 used

Esc   <    >      Ok

從以下四種可能性中選擇一種：

? 按??返回主目錄

? 按?選擇低數(shù)字的目錄

? 按?選擇高數(shù)字的目錄

? 按     確定顯示目錄

按    之后您將看到如下顯示：

           Old results from

           ……………（date + time）

           100 pos

           Esc          Old    New

從以下三種可能性中選擇一種：

? 按??返回主目錄

? 按?查看并標(biāo)記已選目錄中的舊結(jié)果。如果沒(méi)有舊結(jié)果，Pi-102將要求您插入*個(gè)標(biāo)本

? 按     從已選目錄中刪除舊結(jié)果

按    之后您將看到如下顯示：

…..（List Name） /    1

Name 1

Insert Sample

No Thresholds

插入標(biāo)本，按    開(kāi)始檢測(cè)，檢測(cè)過(guò)程中綠色、黃色和紅色指示燈亮。檢測(cè)結(jié)束，您將看到以下顯示：

…（List Name） /    1

Name 1

                 2 RLU

No Thresholds

開(kāi)始下一檢測(cè)，按    兩次。如果您前次結(jié)果的記錄過(guò)長(zhǎng)，請(qǐng)?jiān)诎?nbsp;    之后選擇“Overwrite result”，按?鍵再按    。完成測(cè)量后按 ?? 兩次。再按ON/OFF鍵兩次關(guān)機(jī)。

2．2．2 選項(xiàng)

您可從主目錄中選擇“選項(xiàng)”目錄。在此目錄中您可選擇改變熒光儀設(shè)置的選項(xiàng)。以下是對(duì)這些設(shè)置的解釋：

從主目錄中選擇“選項(xiàng)”只需按?鍵再按     ，顯示如下：

Units

Counting time

Self Test

Print List

Units（單位）：可以選擇結(jié)果以RLU或fg ATP表達(dá)。一般來(lái)說(shuō)檢測(cè)需以RLU來(lái)設(shè)置。

Counting time（計(jì)數(shù)時(shí)間）：默認(rèn)設(shè)定需要5.0秒，編程在0.2－100.0秒之間，使用 ? 鍵再按     進(jìn)行編程。計(jì)數(shù)時(shí)間的不同不會(huì)導(dǎo)致RLU值的變化，因?yàn)轱@示的RLU值是n×0.2秒時(shí)間間隔的平均值。計(jì)數(shù)時(shí)間越長(zhǎng)RLU值越準(zhǔn)確。

Self Test（自身檢測(cè)）：這是檢測(cè)測(cè)量倉(cāng)是否避光。Pi-102會(huì)做一次空白檢測(cè)然后返回目錄。開(kāi)始自身檢測(cè)前，請(qǐng)檢查測(cè)量倉(cāng)是否被空置。

pi-102 食品細(xì)菌快速檢測(cè)儀

Microbial ATP Kit HS Biothema 266-112

1. 試劑盒包括以下試劑：（每套試劑可完成100次實(shí)驗(yàn)）

1.1. ATP Reagent HS （4小瓶） ：含有凍干熒光素酶和熒光素。熒光素酶參加反應(yīng)后大約每分鐘消耗6%ATP。

1.2. Diluent B 10ml （4小瓶） : 用于重新調(diào)配ATP ReagentHS 時(shí)的緩沖劑。

1.3. Extractant B/S 10 mL （1 小瓶） ：提取劑。

1.4. ATP standard 5 mL （1 小瓶）： ATP標(biāo)準(zhǔn)液，含有 10^-7 mol/L ATP。

1.5. ATP Eliminating Reagent （1 小瓶） ：ATP消除劑。

1.6. Cell Lysing Reagent 10 mL （1 小瓶）：細(xì)胞裂解劑，用于重新調(diào)配ATP消除劑 （ATP Eliminating Reagent）

2. 檢測(cè)原理：

2.1. 所有活體細(xì)胞均含有三磷酸腺苷ATP（Adenosine Triphosphate ，分子式C₁₀H₁₆N₅O₁₃P₃ ，化學(xué)簡(jiǎn)式C10H8N4O2NH2（OH）2（PO3H）3H，分子量約507.184）

2.2. 一個(gè)細(xì)菌體內(nèi)ATP含量約為2x10^-18mol, 當(dāng)細(xì)胞死亡后，ATP一般也隨之消亡。通過(guò)檢測(cè)樣品中ATP含量，可推算樣品中細(xì)菌總數(shù)。

3. 試劑使用前準(zhǔn)備工作：

3.1. 揭開(kāi)（請(qǐng)勿直接用手）ATP Reagent HS 瓶蓋。揭開(kāi)Diluent B 瓶蓋，將Diluent B倒入 ATP Reagent HS 試劑瓶，混合后再將混合液倒回Diluent B 試劑瓶,避光冷藏保存。                                 

3.2. Extractant B/S 和 ATP Standard試劑可直接使用。

3.3. ATP Eliminating Reagent與Cell Lysing Reagen混合后使用?；旌弦嚎稍诶洳貭顟B(tài)下保存一周以上，在冷凍狀態(tài)下保存更長(zhǎng)時(shí)間。

4. 檢測(cè)反應(yīng)步驟：

首先對(duì)細(xì)菌外ATP通過(guò)酶進(jìn)行降解。然后使用Extractant B/S釋放細(xì)胞內(nèi)的ATP并通過(guò)酶阻止ATP的降解。zui后加入ATP Reagent HS分析ATP。

通過(guò)光度計(jì)所測(cè)量的ATP與實(shí)際存在的ATP是成正比的。通過(guò)測(cè)量和比對(duì)加入一定量標(biāo)準(zhǔn)ATP之前和之后的結(jié)果，就可能計(jì)算出被測(cè)未知樣品的ATP含量以fg或RLU形式表示。

5. 檢測(cè)步驟：

1）      取被檢樣品按方法進(jìn)行前處理。（后有說(shuō)明）

2）      取處理后樣品50µL樣品和50µL ATP Eliminating Reagent于試管中，靜置10分鐘。

3）      直接加入50µL Extractant B/S 在試管中，之后確認(rèn)所有的ATP Eliminating Reagent 都已經(jīng)和Extractant B/S進(jìn)行了反應(yīng)（用旋渦混合器或手動(dòng)震蕩數(shù)秒）。

4）      加入0.4mL ATP Reagent HS 并進(jìn)行測(cè)量 M1 - Ismp。

5）      加入10µL 100 nmol/L ATP Standard，約1pmol（10^-12） ATP，再測(cè)量其值，M2 - Ismp+std。

     注意：M2- M1 ： M1 值應(yīng)大于10 ，否則需重稀釋樣品檢測(cè)。

6）      按此公式計(jì)算樣品中ATP總數(shù)。

公式為：                M1                                                     

 M2   -   M1     = X

7）      檢測(cè)結(jié)果評(píng)估，推算1ml該樣品細(xì)菌數(shù)。

公式為：                  X * 10⁷ 

     ！ 結(jié)果值為近似值，建議為參考用。

國(guó)家食品微生物*（部分）

等，具體請(qǐng)查閱相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

6. 注意：

1.實(shí)驗(yàn)所用試管和平板必須保證無(wú)ATP存在。

2.請(qǐng)用不透光的玻璃或塑料容器盛放熒光試劑，在進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，應(yīng)注意避免強(qiáng)光照射。

3.可用含有細(xì)菌懸浮液的培養(yǎng)基做空白對(duì)照。

4.同一樣品，*做3組重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

5.實(shí)驗(yàn)加入的 樣品、ATP Eliminating Reagent、Extractant B/S 量必須*。

6.Extractant B/S 和 ATP Reagent HS 比例相差不超過(guò) 1/4

7.ATP Standard 用量始終為 10 μL

8.實(shí)驗(yàn)所用試劑計(jì)量越多，結(jié)果精確度越高。

9.（I_smp+std - I_smp）值應(yīng)比 I_smp 值高10倍以上，否則樣品需再稀釋。

10.如樣品為非細(xì)菌ATP含量較低，可省略清除非細(xì)菌ATP這一步。

11.如果樣品中無(wú)細(xì)胞外游離ATP，*使用266-311 試劑盒。

12.下列情況中細(xì)胞外游離ATP的影響可能依然明顯：

   A 細(xì)胞外游離ATP含量過(guò)高

   B 細(xì)胞內(nèi)ATP 檢出率過(guò)低

   C 樣品所在的介質(zhì) 對(duì)ATP 降解酶反應(yīng)有抑制作用

   對(duì)應(yīng)上述情況可延長(zhǎng)10分鐘的孵育時(shí)間或加入更多濃縮ATP Eliminating Reagent

綜述：

Pi-102 食品細(xì)菌快速測(cè)定儀利用ATP生物發(fā)光法，配合高靈敏光電倍增管和試劑，可在10分鐘內(nèi)對(duì)食品樣品（經(jīng)前處理）中所含微生物總數(shù)做出快速估算，將結(jié)果數(shù)值與國(guó)家相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)應(yīng)，可初步判斷食品樣品中微生物情況，如是否超標(biāo)。

但此方法所得結(jié)果僅供參考，因ATP生物發(fā)光反應(yīng)受各類因素（溫度、酸堿、稀釋濃度等）影響，結(jié)果與常規(guī)培養(yǎng)計(jì)數(shù)所得的CFU（colony formine unit,菌落形成單位）存在一定偏差，所以該檢測(cè)建議客戶設(shè)定臨界值做參考用。

相比常規(guī)培養(yǎng)計(jì)數(shù)法，該檢測(cè)快速、靈敏，尤其是檢測(cè)水樣等微生物含量較低的樣品時(shí)。

Pi-102 多功能熒光儀

原理

ATP是三磷酸腺酐的簡(jiǎn)稱，是細(xì)胞內(nèi)供能分子。Pi-102 食品細(xì)菌快速測(cè)定儀通過(guò)檢測(cè)樣品中ATP與熒光素酶的發(fā)光反應(yīng)，得出光單位讀數(shù)，經(jīng)換算可估算出樣品中ATP總數(shù)水平，進(jìn)一步間接判斷樣品中微生物總數(shù)，為食品衛(wèi)生監(jiān)督現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)提供參考。

首先使用相關(guān)試劑對(duì)細(xì)菌外ATP進(jìn)行降解、消除。再使用提取液釋放細(xì)菌內(nèi)的ATP并通過(guò)酶阻止ATP的降解，zui后加入熒光素酶與ATP進(jìn)行發(fā)光反應(yīng)。

通過(guò)高靈敏度光電倍增管所測(cè)量的發(fā)光值與實(shí)際存在的ATP成正比。再通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)，就可能計(jì)算出被測(cè)樣品的ATP含量并以fg或RLU形式表示。

應(yīng)用范圍

食品工業(yè)、化妝品制造業(yè)、醫(yī)療單位衛(wèi)生監(jiān)測(cè)。

配合試劑，可對(duì)測(cè)液體、固體食品、表面等微生物總數(shù)做快速評(píng)估。注意，結(jié)果為參考用。

配置情況

熒光檢測(cè)儀 主機(jī)                 1 臺(tái)

檢測(cè)試劑 （選配）

Biothem 266-112 試劑盒（食品細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)試劑盒）

技術(shù)參數(shù)

檢測(cè)精度    1 X 10^-18 mol/ATP/assay

檢測(cè)時(shí)間    默認(rèn)5秒 （0.2-100秒可調(diào)）

檢測(cè)模式    RLU 、 fg （細(xì)菌細(xì)胞ATP含量）

資料儲(chǔ)存    結(jié)果可分類儲(chǔ)存，800個(gè)記憶存儲(chǔ)

屏幕顯示    LCD

尺寸/重量    208 *105 * 93 （長(zhǎng)*寬*高mm） / 1.5 kg

測(cè)量值      0 – 99,999 RLU

精確誤差    + / - 5 %

與PC連接   可實(shí)時(shí)檢測(cè)并傳輸結(jié)果

電力         內(nèi)置 Ni/Cd 充電電池，外接電源

Pi-102 食品細(xì)菌快速測(cè)定儀 與SystemSUREⅡ ATP 熒光儀對(duì)比

相關(guān)證書(shū)

美國(guó)MPC（Medical Packaging Corporation）總公司 ——Hygiena母公司出具：

美國(guó)公共健康與社會(huì)福利部（衛(wèi)生與公眾服務(wù)部）

食品及藥物管理局 許可證 No :2023790

美國(guó)加利福尼亞州 公眾衛(wèi)生部

食品及藥物管理局 生產(chǎn)許可證No :61193

注：本產(chǎn)品不屬于醫(yī)療器械

Pi-102熒光儀使用手冊(cè)

版本：1.0

目錄

1．  儀器

1．1          儀器簡(jiǎn)介

1．2          應(yīng)用試管尺寸

1．3          按鍵操作說(shuō)明

1．4          電源管理

1．5          安裝snapshot的檢測(cè)倉(cāng)

2．  測(cè)量

2．1   快速啟動(dòng)

2．2   測(cè)量選項(xiàng)

2．2．1 目錄

2．2．2 選項(xiàng)

3．  維護(hù)和故障排除

3．1 維護(hù)

3．2 故障排除

質(zhì)保承諾： 承諾聲明

Hygiena保證在Pi-102售出之后的12個(gè)月內(nèi)對(duì)其性能和功能負(fù)責(zé)。由適當(dāng)?shù)牟僮魉斐傻膶?duì)Pi-102的損壞以及使用未經(jīng)*的零配件均不在此保證范圍內(nèi)。

警告：

請(qǐng)?jiān)谑褂肞i-102熒光儀之前仔細(xì)閱讀此使用手冊(cè)。

清潔前請(qǐng)務(wù)必?cái)嚅_(kāi)電源。只可使用濕抹布清潔儀器表面，任何清潔劑都可能有損儀器表面。

只可使用Pi-102的電源插頭，其它的電源設(shè)備可能損壞Pi-102。

只有經(jīng)過(guò)*和培訓(xùn)的人員才能從事Pi-102的維修和維護(hù)。

此手冊(cè)敘述詳盡，Hygiena不對(duì)由于使用不當(dāng)造成的損壞負(fù)責(zé)。

與本文件相關(guān)的所有權(quán)利歸Hygiena所有，未經(jīng)Hygiena書(shū)面*，不得擅自轉(zhuǎn)載本文件任何內(nèi)容。

Hygiena International Ltd.和Hygiena LLC是美國(guó) Medical Packaging Corporation Inc.,子公司。

1．儀器

1．1 儀器簡(jiǎn)介

Pi-102熒光儀是一臺(tái)測(cè)量生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光的高靈敏度儀器。它可以獨(dú)立使用，也可以與PC機(jī)和配套軟件相連。

1．2 應(yīng)用試管規(guī)格

標(biāo)準(zhǔn)的Hygiena試管的尺寸是12×55mm，但直徑在11－12mm，高在47－82mm范圍之內(nèi)的試管都可在Pi-102機(jī)器上使用。

Pi-102還提供了一個(gè)Hygiena snapshot檢測(cè)拭子（用于衛(wèi)生監(jiān)控）使用的附加倉(cāng)。在這種情況下無(wú)需使用試管。

1．3 鍵盤(pán)和顯示器

ON/OFF：開(kāi)關(guān)鍵

??：回到上級(jí)菜單，或跳出鍵

?和?：瀏覽菜單

         ：從菜單眾選擇程序，或進(jìn)入鍵

O O O ：顯示結(jié)果

關(guān)于Pi-102

Supply：連接電源

Charge（Std.）：使用電源操作Pi-102

Charge（Fast）：快速充電設(shè)備

1．4 電源

用戶可選擇使用電源或使用充電電池。當(dāng)使用電源的同時(shí)，Pi-102對(duì)電池進(jìn)行充電。Pi-102一側(cè)的“Charge”選擇鍵應(yīng)置于“Std.”位置。若使用快充，插入電源后將“Charge”選擇鍵至于“Fast”。電池型號(hào)是Ni/Cd，為避免“記憶受損”，等“empty”指示等亮再充電。

1．5 安裝snapshot檢測(cè)的附加倉(cāng)

建議在開(kāi)啟Pi-102之前進(jìn)行安裝。只要小心移除Pi-102上的倉(cāng)蓋，安放上附加部分再將倉(cāng)蓋安裝在附加部分頂部，附加倉(cāng)就被輕松安裝好了。安裝時(shí)注意各部件連接正確并安裝在正確的位置。這樣，Pi-102就可檢測(cè)snapshot裝置了。去除附加倉(cāng)只需除掉倉(cāng)蓋和附加倉(cāng)，再把倉(cāng)蓋蓋回倉(cāng)口即可。

2．     測(cè)量

2．1 快速啟動(dòng)

? 推ON/OFF鍵

? 按    （目錄）

? 按    （OK），或按?在目錄中選擇02…08再按

? 按    （新），目錄中的舊結(jié)果被清除

? 按     開(kāi)始測(cè)量

? 下一標(biāo)本，按     兩次

? 結(jié)果被保存，按?可瀏覽目錄中以前保存的結(jié)果

? 按??兩側(cè)，推出測(cè)量

? 按ON/OFF鍵兩次，關(guān)閉Pi-102。

注意：測(cè)量過(guò)程中請(qǐng)保持測(cè)量倉(cāng)處于關(guān)閉狀態(tài)，測(cè)量完畢后再取出標(biāo)本。

2．2 測(cè)量選項(xiàng)

開(kāi)機(jī)后，屏幕顯示兩行字：LIST（目錄）和OPTIONS（選項(xiàng)）。

2．2．1 目錄：

您可選擇8個(gè)不同的目錄，每個(gè)可執(zhí)行100個(gè)檢測(cè)。

選擇目錄請(qǐng)按    ，屏幕將顯示：

List 01

Name ……

100 pos     , 00 used

Esc   <    >      Ok

從以下四種可能性中選擇一種：

? 按??返回主目錄

? 按?選擇低數(shù)字的目錄

? 按?選擇高數(shù)字的目錄

? 按     確定顯示目錄

按    之后您將看到如下顯示：

           Old results from

           ……………（date + time）

           100 pos

           Esc          Old    New

從以下三種可能性中選擇一種：

? 按??返回主目錄

? 按?查看并標(biāo)記已選目錄中的舊結(jié)果。如果沒(méi)有舊結(jié)果，Pi-102將要求您插入*個(gè)標(biāo)本

? 按     從已選目錄中刪除舊結(jié)果

按    之后您將看到如下顯示：

…..（List Name） /    1

Name 1

Insert Sample

No Thresholds

插入標(biāo)本，按    開(kāi)始檢測(cè)，檢測(cè)過(guò)程中綠色、黃色和紅色指示燈亮。檢測(cè)結(jié)束，您將看到以下顯示：

…（List Name） /    1

Name 1

                 2 RLU

No Thresholds

開(kāi)始下一檢測(cè)，按    兩次。如果您前次結(jié)果的記錄過(guò)長(zhǎng)，請(qǐng)?jiān)诎?nbsp;    之后選擇“Overwrite result”，按?鍵再按    。完成測(cè)量后按 ?? 兩次。再按ON/OFF鍵兩次關(guān)機(jī)。

2．2．2 選項(xiàng)

您可從主目錄中選擇“選項(xiàng)”目錄。在此目錄中您可選擇改變熒光儀設(shè)置的選項(xiàng)。以下是對(duì)這些設(shè)置的解釋：

從主目錄中選擇“選項(xiàng)”只需按?鍵再按     ，顯示如下：

Units

Counting time

Self Test

Print List

Units（單位）：可以選擇結(jié)果以RLU或fg ATP表達(dá)。一般來(lái)說(shuō)檢測(cè)需以RLU來(lái)設(shè)置。

Counting time（計(jì)數(shù)時(shí)間）：默認(rèn)設(shè)定需要5.0秒，編程在0.2－100.0秒之間，使用 ? 鍵再按     進(jìn)行編程。計(jì)數(shù)時(shí)間的不同不會(huì)導(dǎo)致RLU值的變化，因?yàn)轱@示的RLU值是n×0.2秒時(shí)間間隔的平均值。計(jì)數(shù)時(shí)間越長(zhǎng)RLU值越準(zhǔn)確。

Self Test（自身檢測(cè)）：這是檢測(cè)測(cè)量倉(cāng)是否避光。Pi-102會(huì)做一次空白檢測(cè)然后返回目錄。開(kāi)始自身檢測(cè)前，請(qǐng)檢查測(cè)量倉(cāng)是否被空置。

pi-102 食品細(xì)菌快速檢測(cè)儀

Microbial ATP Kit HS Biothema 266-112

1. 試劑盒包括以下試劑：（每套試劑可完成100次實(shí)驗(yàn)）

1.1. ATP Reagent HS （4小瓶） ：含有凍干熒光素酶和熒光素。熒光素酶參加反應(yīng)后大約每分鐘消耗6%ATP。

1.2. Diluent B 10ml （4小瓶） : 用于重新調(diào)配ATP ReagentHS 時(shí)的緩沖劑。

1.3. Extractant B/S 10 mL （1 小瓶） ：提取劑。

1.4. ATP standard 5 mL （1 小瓶）： ATP標(biāo)準(zhǔn)液，含有 10^-7 mol/L ATP。

1.5. ATP Eliminating Reagent （1 小瓶） ：ATP消除劑。

1.6. Cell Lysing Reagent 10 mL （1 小瓶）：細(xì)胞裂解劑，用于重新調(diào)配ATP消除劑 （ATP Eliminating Reagent）

2. 檢測(cè)原理：

2.1. 所有活體細(xì)胞均含有三磷酸腺苷ATP（Adenosine Triphosphate ，分子式C₁₀H₁₆N₅O₁₃P₃ ，化學(xué)簡(jiǎn)式C10H8N4O2NH2（OH）2（PO3H）3H，分子量約507.184）

2.2. 一個(gè)細(xì)菌體內(nèi)ATP含量約為2x10^-18mol, 當(dāng)細(xì)胞死亡后，ATP一般也隨之消亡。通過(guò)檢測(cè)樣品中ATP含量，可推算樣品中細(xì)菌總數(shù)。

3. 試劑使用前準(zhǔn)備工作：

3.1. 揭開(kāi)（請(qǐng)勿直接用手）ATP Reagent HS 瓶蓋。揭開(kāi)Diluent B 瓶蓋，將Diluent B倒入 ATP Reagent HS 試劑瓶，混合后再將混合液倒回Diluent B 試劑瓶,避光冷藏保存。                                 

3.2. Extractant B/S 和 ATP Standard試劑可直接使用。

3.3. ATP Eliminating Reagent與Cell Lysing Reagen混合后使用?；旌弦嚎稍诶洳貭顟B(tài)下保存一周以上，在冷凍狀態(tài)下保存更長(zhǎng)時(shí)間。

4. 檢測(cè)反應(yīng)步驟：

首先對(duì)細(xì)菌外ATP通過(guò)酶進(jìn)行降解。然后使用Extractant B/S釋放細(xì)胞內(nèi)的ATP并通過(guò)酶阻止ATP的降解。zui后加入ATP Reagent HS分析ATP。

通過(guò)光度計(jì)所測(cè)量的ATP與實(shí)際存在的ATP是成正比的。通過(guò)測(cè)量和比對(duì)加入一定量標(biāo)準(zhǔn)ATP之前和之后的結(jié)果，就可能計(jì)算出被測(cè)未知樣品的ATP含量以fg或RLU形式表示。

5. 檢測(cè)步驟：

1）      取被檢樣品按方法進(jìn)行前處理。（后有說(shuō)明）

2）      取處理后樣品50µL樣品和50µL ATP Eliminating Reagent于試管中，靜置10分鐘。

3）      直接加入50µL Extractant B/S 在試管中，之后確認(rèn)所有的ATP Eliminating Reagent 都已經(jīng)和Extractant B/S進(jìn)行了反應(yīng)（用旋渦混合器或手動(dòng)震蕩數(shù)秒）。

4）      加入0.4mL ATP Reagent HS 并進(jìn)行測(cè)量 M1 - Ismp。

5）      加入10µL 100 nmol/L ATP Standard，約1pmol（10^-12） ATP，再測(cè)量其值，M2 - Ismp+std。

     注意：M2- M1 ： M1 值應(yīng)大于10 ，否則需重稀釋樣品檢測(cè)。

6）      按此公式計(jì)算樣品中ATP總數(shù)。

公式為：                M1                                                     

 M2   -   M1     = X

7）      檢測(cè)結(jié)果評(píng)估，推算1ml該樣品細(xì)菌數(shù)。

公式為：                  X * 10⁷ 

     ！ 結(jié)果值為近似值，建議為參考用。

國(guó)家食品微生物*（部分）

等，具體請(qǐng)查閱相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

6. 注意：

1.實(shí)驗(yàn)所用試管和平板必須保證無(wú)ATP存在。

2.請(qǐng)用不透光的玻璃或塑料容器盛放熒光試劑，在進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，應(yīng)注意避免強(qiáng)光照射。

3.可用含有細(xì)菌懸浮液的培養(yǎng)基做空白對(duì)照。

4.同一樣品，*做3組重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

5.實(shí)驗(yàn)加入的 樣品、ATP Eliminating Reagent、Extractant B/S 量必須*。

6.Extractant B/S 和 ATP Reagent HS 比例相差不超過(guò) 1/4

7.ATP Standard 用量始終為 10 μL

8.實(shí)驗(yàn)所用試劑計(jì)量越多，結(jié)果精確度越高。

9.（I_smp+std - I_smp）值應(yīng)比 I_smp 值高10倍以上，否則樣品需再稀釋。

10.如樣品為非細(xì)菌ATP含量較低，可省略清除非細(xì)菌ATP這一步。

11.如果樣品中無(wú)細(xì)胞外游離ATP，*使用266-311 試劑盒。

12.下列情況中細(xì)胞外游離ATP的影響可能依然明顯：

   A 細(xì)胞外游離ATP含量過(guò)高

   B 細(xì)胞內(nèi)ATP 檢出率過(guò)低

   C 樣品所在的介質(zhì) 對(duì)ATP 降解酶反應(yīng)有抑制作用

   對(duì)應(yīng)上述情況可延長(zhǎng)10分鐘的孵育時(shí)間或加入更多濃縮ATP Eliminating Reagent

綜述：

Pi-102 食品細(xì)菌快速測(cè)定儀利用ATP生物發(fā)光法，配合高靈敏光電倍增管和試劑，可在10分鐘內(nèi)對(duì)食品樣品（經(jīng)前處理）中所含微生物總數(shù)做出快速估算，將結(jié)果數(shù)值與國(guó)家相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)應(yīng)，可初步判斷食品樣品中微生物情況，如是否超標(biāo)。

但此方法所得結(jié)果僅供參考，因ATP生物發(fā)光反應(yīng)受各類因素（溫度、酸堿、稀釋濃度等）影響，結(jié)果與常規(guī)培養(yǎng)計(jì)數(shù)所得的CFU（colony formine unit,菌落形成單位）存在一定偏差，所以該檢測(cè)建議客戶設(shè)定臨界值做參考用。

相比常規(guī)培養(yǎng)計(jì)數(shù)法，該檢測(cè)快速、靈敏，尤其是檢測(cè)水樣等微生物含量較低的樣品時(shí)。